摘要：目的设计猴痘病毒(MPXV)抗原,选择多种方案设计抗猴痘病毒mRNA候选疫苗,并完成其表达鉴定及小鼠体内的免疫效果评价。方法选取猴痘病毒M1R、A35R、A29L、H3L基因设计三组候选抗原基因(命名为:M1RA35R、A29L-H3L-A35R、A35R-Fc),并设置一组痘苗病毒(VACV)基因(L1R-A33R)作为对照,分别连接至mRNA制备专用载体pGEM-3Zf-n3,通过线性化、体外转录、纯化和加帽获得功能性mRNA,利用Western blot、IFA对目的抗原进行鉴定。通过微流控芯片制备LNP-mRNAs疫苗,制定免疫程序并完成小鼠的免疫及特异性抗体水平监测。结果成功构建3组抗猴痘病毒的mRNA疫苗和1组抗痘苗病毒的mRNA疫苗,四组疫苗均能表达抗原蛋白,并且制备的4组LNP-mRNAs疫苗在免疫后84 d仍维持较高的特异性抗体水平。结论成功完成猴痘病毒mRNA疫苗的构建、表达及鉴定,并通过对不同猴痘病毒抗原设计的验证,为以后猴痘疫苗的研发提供数据支撑。