摘要：目的构建PGC-LV-syncytin慢病毒载体并建立Syncytin基因表达下调的jurkat细胞系.方法利用RNA干扰序列软件设计并筛选有效干扰序列,将构建好的Syncytin表达质粒与慢病毒包装质粒共转染至包装细胞293T,包装产生病毒颗粒后感染jurkat细胞,获得Syncytin稳定沉默的细胞系.荧光显微镜下观察感染效率,分别使用RealtimePCR和Annexin V-APC单染法结合流式细胞仪检测目的基因表达水平和细胞凋亡率.结果成功构建了具有Syncytin干扰效果的慢病毒载体及其稳定沉默的jurkat细胞系.结论该细胞系的构建为进一步研究Syncytin基因在白血病的功能提供了细胞模型.

摘要：目的干扰β-catenin在jurkat和K562细胞中的表达,探讨β-catenin对细胞生长、增殖和凋亡等方面的作用。方法设计合成β-catenin的siRNA干扰序列和对照序列,阳离子脂质体法介导转入jurkat和K562细胞,分别用RT-PCR和Western blot方法检测β-catenin在干扰后mRNA水平和蛋白水平的表达变化。采用台盼兰拒染法计数,MTT比色法和集落形成能力检测细胞的生长增殖,AnnexinV/PI检测细胞凋亡以及PI染色检测细胞周期。结果与对照组相比,实验组细胞β-catenin的mRNA和蛋白水平的表达均降低。在jurkat细胞,实验组和对照组的细胞增殖抑制率分别为(49.30±9.86)%和(15.10±6.55)%(P0.05),实验组细胞凋亡率有所增加。在这两种细胞系中均未发现细胞周期的改变。结论β-catenin基因有可能对Jur-kat和K562细胞具有促进细胞生长、增殖,抑制凋亡的作用。