摘要：keapl-Nrf2/ARE信号通路是大多数生物体内抗氧化应激反应的关键通路,在抗炎症、免疫等中起重要作用。本文综述了硬骨鱼类keapl-Nrf2/ARE信号通路的相关分子生物学特性、活化机制、主要功能以及相关激活剂等最新研究进展,以期为预防和治疗硬骨鱼类受此信号通路调控的相关疾病提供新的思路。

摘要：目的:针对keap1构建shRNA慢病毒干扰载体,并评价慢病毒介导的RNA干扰在人前列腺癌细胞PC3中的基因沉默效应。方法:利用生物信息学方法设计针对keap1的RNAi寡聚核苷酸序列;采用慢病毒载体构建keap1的shRNA载体,利用大肠杆菌进行重组表达,利用293T细胞包装得到重组腺病毒;依据绿色荧光蛋白(GFP)示踪,逐孔稀释法确定转染效率及滴度;以实时荧光定量法比较各靶序列的基因干扰效果。结果:筛选了所构建的4个keap1靶向序列,以慢病毒载体构建完成对应keap1的shRNA质粒。通过瞬时转染筛选得到效率最佳(干扰效率达到80%)的靶序列和工作条件。结论:本研究成功构建并筛选了针对keap1的shRNA慢病毒载体,有效抑制PC3细胞中keap1的表达。

摘要：对先导化合物CPUY191001结构进行改造,以期得到活性更好的ARE-Nrf2激活剂。通过羟醛缩合反应合成17个目标化合物,采用MTT法测试目标化合物的抗增殖活性,并利用荧光素酶报告基因实验考察目标化合物对ARE的诱导活性。MTT数据显示,该系列化合物几乎无细胞毒性(IC_(50)>50μmol/L),活性测试结果表明,大部分类查尔酮衍生物对ARE具有一定的诱导活性,其中化合物2,3,10活性较优,且具有浓度依赖性。化合物2,3,10在抗炎与肿瘤预防治疗药物的研究领域中具有一定的应用前景,值得进一步研究。

摘要：目的 探讨高氧暴露对早产新生大鼠肺组织中转录因子NF-E2相关因子2(nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2)和胞浆蛋白伴侣分子keap1表达的影响。 方法 早产新生SD大鼠生后1 d完全随机设计方法分为两组：高氧组与空气组。高氧组持续暴露于常压氧舱中，氧质量浓度>85%；空气组置于同一室常压空气中。两组分别于高浓度氧或空气暴露后1、4、7、10、14 d提取肺组织标本。采用石蜡包埋切片行HE染色，观察肺组织的病理学变化。采取RT-PCR方法测定Nrf2和keap1 mRNA水平的动态表达。Western blot检测Nrf2蛋白水平的表达。 结果 (1)与空气组相比，高氧组4、7 d早产鼠肺组织Nrf2 mRNA表达显著增强(4 d：0.314&#177;0.064 vs.0.521&#177;0.086，7 d：0.440&#177;0.121 vs.0.658&#177;0.076)，10 d出现下降趋势，14 d明显减弱( P 0.05)；7 d后Nrf2蛋白呈下降趋势，其表达较空气组减弱，但7 d两者相比差异无统计学意义( P >0.05)，而10、14 d显著减弱(10 d：1.325&#177;0.464 vs.0.755&#177;0.348，14 d：1.662&#177;0.474 vs.0.867&#177;0.115)( P <0.05)。 结论 氧化暴发诱导肺组织中Nrf2与keap1的异常表达，调节机体氧化应激水平，参与高氧肺损伤发病过程。高氧暴露可能通过上调Nrf2活性，提高机体抗氧化，在减轻高氧肺损伤过程中发挥一定抗氧化作用。