摘要：草莓滑刃线虫(Aphelenchoides fragariae)是一种叶和芽寄生线虫,可侵染250多种植物,被列入我国检疫性有害生物名录。本研究通过比较GenBank数据库中滑刃属线虫相关序列,以草莓滑刃线虫rDNA-ITS序列为靶标,设计草莓滑刃线虫lamp特异性引物,建立了可视化lamp反应检测体系,并采用目标线虫及近似种线虫DNA进行引物特异性验证。结果表明,本研究建立的lamp检测方法可在1 h内对草莓滑刃线虫进行检测,供试其他22种植物线虫均未发生非特异性扩增,仅草莓滑刃线虫出现扩增,具有良好的物种特异性;检测灵敏度可达1/250条草莓滑刃线虫;检测结果可以直接用肉眼判断。因此,本方法具有反应时间短、灵敏度高、设备要求低的优点,适于基层实验室开展草莓滑刃线虫检测。

摘要：目的:建立志贺氏菌的快速lamp检测技术。方法:以志贺氏菌ipaH基因为靶序列,设计lamp特异性引物,同时检测引物的灵敏度和特异性。建立lamp检测病原菌的方法,并对lamp与荧光定量PCR检测方法的灵敏度、特异性进行比对。结果:lamp方法的检出限为4×100CFU/mL,荧光定量PCR的检出限为4×101CFU/mL,实验结果可用肉眼观察。结论:lamp检测方法不仅能够达到荧光定量PCR方法的准确性,而且检测限低,灵敏度高。

摘要：蛤蚧为我国名贵动物中药材,为建立蛤蚧的lamp可视化检测方法,实现其与混伪品的高效特异鉴别,该研究通过MEGA 6.0分析蛤蚧与其13种混伪品共65条12S rRNA序列,在线设计lamp引物,并优化扩增条件,考察反应灵敏度,对蛤蚧及其混伪品进行鉴别验证。结果表明,基于12S rRNA序列的蛤蚧及其13种混伪品均可通过BLAST比对准确区分。蛤蚧12S rRNA序列较为保守,10批次30条序列在引物设计区仅含2条单倍型和3个变异位点,成功设计了6条lamp特异引物。64℃反应1 h,80℃灭活5 min,即可完成蛤蚧的可视化检测,最低检测浓度为5μg·L-1,高于传统PCR 2个数量级。该方法特异性强、灵敏度高、检测方便、反应时间短,且闭管操作,避免了污染,可实现蛤蚧与混伪品的快速可视化鉴别。

摘要：根据GenBank登录的柑橘褪绿矮化相关病毒(Citrus chlorotic dwarf-associated virus,CCDaV)的移动蛋白(MP)基因序列设计了一组特异性引物,经体系优化,建立了CCDaV的环介导等温核酸扩增(lamp)检测方法。结果显示该方法能特异扩增CCDaV,与其他5种柑橘病原物(柑橘衰退病毒、柑橘碎叶病毒、柑橘裂皮病类病毒、温州蜜柑萎缩病毒和柑橘黄龙病菌)不发生反应;灵敏度为PCR的100倍,与实时荧光PCR的灵敏度相同。用lamp方法对50个田间样品进行检测,与PCR和实时荧光PCR的检测结果一致,证明该方法可用于田间样品的检测。该lamp检测方法可特异、灵敏、快速地对CCDaV样品进行检测。

摘要：针对转基因大豆的特异基因CP4-EPSPS(GenBank accession numberAY5966948)设计引物,用lamp引物在线设计软件设计引物。对反应温度、反应时间、镁离子浓度、Bst DNA聚合酶浓度等扩增条件进行优化,建立了lamp反应体系,检出限为0.01%。

摘要：基于荚膜多糖cpsA基因设计引物,建立海豚链球菌可视化环介导等温扩增(Loop-mediated isothermal amplification,lamp)技术,以快速检测鱼类养殖中的海豚链球菌。结果表明,lamp最佳反应条件为65℃反应20 min,镁离子浓度为1.2 mmol/L、dNTPs浓度为0.64 mmol/L、内外引物比例为16∶1。特异性检测结果表明:该方法能特异性检出海豚链球菌,对无乳链球菌和其他14种菌检测结果均呈阴性;灵敏度检测结果表明,该lamp方法灵敏度为2.12×10^(-5)ng/μL,比PCR检测方法灵敏度高100倍;适用性分析结果表明,该lamp方法在模板中存在鱼类基因组干扰下也能正确完成检测。研究中建立的lamp检测方法为海豚链球菌的检测提供一种可视化、灵敏、成本低的快速检测技术。

摘要：通过设计转基因大豆内源基因(Lectin)、外源基因NOS和2个转基因大豆品系(GTS 40-3-2,MON89788)特异性lamp引物,建立快速检测转基因大豆以及鉴定转基因大豆品系的lamp体系,并选取国内豆制品利用CTAB法进行DNA提取,并针对上述基因进行PCR和lamp扩增的对比,建立起了检测大豆制品中转基因成分的定性的lamp方法。结果表明:4个lamp方法均有较好的特异性,除了NOS、GTS 40-3-2的检测限为0.1%外,其他lamp方法的灵敏度为0.01%,均能满足实际检测要求;在实时浊度lamp法检测大豆制品转基因成分的鉴定中,传统的CTAB法能成功提取大豆粗加工制品的DNA,且DNA纯度能够进行核酸扩增反应。利用转基因外引物进行的普通PCR结果与实时浊度lamp结果是一致的,说明建立的转基因实时浊度lamp检测方法有很好的准确性。

摘要：针对现有申报信息管理中存在的申报信息采集效率低、审批慢、归档不全面等问题,基于lamp(Linux+Apache+MySQL+PHP)框架,用MySQL作为后台数据库,利用PHP、JavaScript、HTML、CSS混合编程技术,设计并实现了一个申报信息管理系统,将人员、申报信息、角色管理有机结合起来,形成高效率的申报信息管理平台,实现申报信息的增删改查、历史信息管理、申报信息公示等功能。该系统在实际中得到了很好的应用,用户反应良好,大大提高了申报信息管理的效率。

摘要：【目的】本研究旨在为水稻干尖线虫(Aphelenchoides besseyi Christie,1942)的快速检测鉴定和早期诊断提供一个新的检测方法。【方法】利用水稻干尖线虫18S核糖体RNA基因,设计了水稻干尖线虫lamp的特异引物,该引物包括1对外引物、1对内引物和1对环引物,以lamp特异引物对待测样品DNA进行恒温扩增,扩增产物通过电泳法和荧光染料法进行检测,电泳检测出现阶梯状条带或加入荧光染料显现绿色荧光,则证明待检样品中含有水稻干尖线虫。【结果】本方法可以检测鉴定水稻干尖线虫不同虫态(雌虫、雄虫、幼虫或卵)的个体,可以从多种线虫混合的样品和植物组织样品中直接检测出水稻干尖线虫,检测灵敏度达到1/1000条虫DNA。【结论】本检测方法具有准确、灵敏、稳定和结果直观的优点,且操作简便、实用性强。

摘要：本文首先介绍了Linux+Apache+Mysql+PHP平台的搭建和配置,然后以网上商店为例给出了基于lamp的电子商务平台的开发原理、系统功能的具体设计与实现。