摘要：旨在采用凤仙花(Impatiens balsamina L)提取物2-甲氧基-1,4-萘醌(MNQ)的衍生物D_(19)消除体外暴露于脂多糖(lps)中牛卵巢卵泡颗粒细胞(GCs)的炎症反应,并缓减由lps引起的卵泡GCs功能性紊乱。本研究采集性成熟且健康的荷斯坦牛卵巢组织,分离并培养卵泡GCs。MTT法测定D_(19)和lps对卵泡GCs存活率的影响。试验分为3组:对照组、lps处理组和D_(19)联合lps处理组,每组3个重复。qRT-PCR测定炎性因子和类固醇合成相关基因的相对表达量。TEM观察D_(19)对细胞炎性损伤的保护作用。ELISA检测培养液上清中雌二醇(E_(2))和孕酮(P_(4))的含量。结果表明,D_(19)对卵泡GCs作用12 h的最大安全浓度为64μmol·L^(-1)。lps浓度为10μg·mL^(-1)时,作用12 h对卵泡GCs存活率影响不大,但炎性因子IL-6、IL-1β和TNF-α的相对表达量显著升高(P<0.01),D_(19)+L组与lps组比较炎性因子的相对表达量却显著降低(P<0.01)。通过TEM观察表明D_(19)对lps引起的细胞器结构性损伤具有保护作用。ELISA结果表明,lps处理后培养液中E_(2)和P_(4)的含量显著降低(P<0.01),qRT-PCR检测到类固醇合成相关基因CYP19A1、CYP11A1、3β-HSD和STAR的相对表达量也显著降低(P<0.01)。但D_(19)联合lps处理后,E_(2)和P_(4)分泌量以及类固醇合成相关基因的相对表达量均比lps组显著升高(P<0.01)。本研究证明MNQ的衍生物D_(19)具有消除lps体外诱导卵泡GCs炎症反应的功能,并能一定程度缓减lps导致的卵泡GCs功能性紊乱。

摘要：Toll样受体(toll-like receptor,TLR)成员TLR4可识别革兰氏阴性细菌的脂多糖(lipopolysaccharide,lps),参与宿主免疫炎症反应。研究旨在通过干扰基因TLR4,以阐释TLR4对炎性细胞因子基因表达水平和鸡巨噬细胞HD11凋亡的影响,为完善TLR4在鸡免疫反应中的分子调控机制提供一定依据。不同剂量lps感染鸡HD11细胞,检测感染后不同时间点TLR4及免疫炎性相关基因表达量。设计3条TLR4基因干扰片段,分别转染鸡HD11细胞,qRT-PCR和流式分别检测lps感染前后TLR4和免疫炎性相关基因表达量以及细胞凋亡。结果显示,1μg/mL lps感染8 h时诱导基因TLR4、IL-1β、IL-8和IL-6的表达效果最佳。成功干扰TLR4基因后,lps感染鸡HD11细胞时促炎因子基因IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α表达量显著性降低(P0.05)。结果说明,调节TLR4基因的表达可直接影响细胞对lps的炎症反应,为控制过度炎症反应提供新思路和干预靶点,对缓解应激性病理损伤和提高家禽健康具有实践意义。

摘要：医疗专项工程是影响医院建设项目目标的重要因素。依据lps设计医疗专项工程的三级拉式流程,一级流程对应主控计划,二级流程对应阶段性计划,三级流程对应周、日计划,并在阶段性计划和周、日计划之间增加了前瞻性计划,统筹考虑在同一功能单元内各专业工程作业的合理逻辑关系和约束条件,优化末端工作流;构建医疗专项工程一体化控制框架模型,提出医疗专项工程的管理要点,以实现医疗专项工程与建造主线的合理穿插、动态调整和有效完成,保障医院建设项目目标的顺利实现。

摘要：本研究的主要目的是探讨适宜浓度短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)混合物对炎症环境下小胶质细胞的抑炎作用及其机制.采用脂多糖(lps)刺激小鼠小胶质细胞系BV-2细胞建立神经炎症模型,并利用CCK8试剂盒检测不同浓度单一的乙酸钠、丙酸钠、丁酸钠处理后的细胞活力.设计选取这三种SCFAs对细胞活力无影响、且有抑炎效果的特定浓度进行组合(SCFAs mix),进一步检测SCFAs mix对lps刺激下BV-2细胞炎症反应的影响及机制,包括:a.用一氧化氮(NO)试剂盒检测NO的释放;b.用ELISA检测炎症因子TNF-α、IL-6的释放;c.用qRT-PCR和Western blot检测炎症因子TNF-α、IL-6、炎症小体NLRP3、炎症通路相关蛋白TLR4、NF-κB等的表达变化.结果表明lps刺激BV-2细胞4 h后,在体系中添加特定浓度的单一SCFA处理12 h后,不能缓解BV-2细胞的炎症反应,而将上述SCFAs配制成同等终浓度的SCFAs mix处理12 h却能显著降低细胞培养上清液中NO、TNF-α和IL-6 (均P<0.001)的量,还能抑制BV-2细胞内iNOS、TNF-α、IL-6和NLRP3 mRNA的升高(均P<0.001);通过对炎症信号通路关键分子的检测发现,SCFAs mix可以抑制lps诱导的BV-2细胞内TLR4、MyD88、TRAF6和NF-κB蛋白的表达升高.综上可见:适宜浓度的混合SCFAs可通过调控TLR4/MyD88/TRAF6/NF-κB炎症通路抑制lps诱导的小胶质细胞的炎症反应,而起到抗炎的保护作用.

摘要：目的:利用CRISPR/Cas9技术构建Toll样受体4(TLR4)基因敲除小鼠模型,并观察突变小鼠对革兰氏阴性细菌脂多糖(lps)刺激响应的变化。方法:针对TLR4基因外显子2设计并合成1对sgRNA片段,与编码Cas9的mRNA混合后通过受精卵显微注射方法,建立TLR4基因敲除小鼠,通过繁育获得基因敲除纯合子小鼠(TLR4-/-小鼠);通过lps刺激,分析TLR4-/-小鼠对炎症应激的反应情况,并在分子和病理水平上和野生型对照(WT)进行比较。结果:PCR及测序检测表明TLR4基因外显子2在小鼠基因中被成功敲除;给予lps刺激后,IL1β、IL6、My D88、i NOS及TNFa等炎症因子的表达在野生型小鼠的心、肝和肺组织中显著上调,而在TLR4-/-小鼠中则几乎没有变化;血生化指标显示lps刺激后WT小鼠血清中的尿素(Urea)和肌酐(Cre)水平显著升高,而TLR4-/-小鼠刺激前后无显著变化,病理分析同样发现TLR4-/-小鼠能够抵抗lps对肾组织的损伤。结论:利用CRISPR/Cas9技术成功构建了TLR4基因剔除小鼠模型,TLR4的缺失能够降低IL1β、IL6、My D88、i NOS及TNFa炎症因子对lps刺激的响应,抑制lps引起的炎症反应及对组织的损伤。

摘要：本试验旨在探讨脂多糖(lps)对大鼠乳腺上皮细胞中αs1-酪蛋白(CSN1S1)、β-酪蛋白(CSN2)和乳清蛋白(α-LA)3种主要酪蛋白基因表达的影响。采用单因素试验设计,用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法研究在催乳素诱导作用下,0、100、500、1000、5000和25000 ng/mL的lps作用于HC11细胞3和24 h对酪蛋白基因(CSN1S1、CSN2和α-LA)、葡萄糖转运因子1(GLUT1)、葡萄糖转运因子8(GLUT8)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的影响。结果表明:不同剂量、不同作用时间的lps作用于HC11细胞,均显著抑制了CSN2基因的表达;作用3 h时,500~1000 ng/mL的lps显著增加了α-LA基因的表达量(P<0.05),作用24 h时,所有剂量的lps均显著抑制了α-LA基因的表达(P<0.05);500~25000 ng/mL的lps作用3 h时和所有剂量的lps作用24 h时均显著增加了CSN1S1基因的表达量(P<0.05);lps显著增加了TNF-α基因的表达量(P<0.05);1000 ng/mL的lps作用3 h时和100~25000 ng/mL的lps作用24 h时,均显著增加了IL-6基因的表达量(P<0.05);500~25000 ng/mL的lps作用3 h时显著增加了IL-1β基因的表达量(P<0.05);从时间效应来看,总体趋势是3种细胞因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)在作用24 h时的基因表达量均高于作用3 h时。大于5000 ng/mL的lps作用3 h时显著增加了GLUT1基因的表达量(P<0.05),所有剂量lps均显著抑制了GLUT8基因的表达(P<0.05)。综上,在大鼠乳腺上皮细胞中,lps对不同酪蛋白基因的表达有不同的影响,lps能抑制CSN2和α-LA基因的表达,却能增强CSN1S1基因的表达。

摘要：首先考虑液相烧结工艺条件及组分对高比重钨合金微结构和各相性质的影响 ,再从细观力学的角度考虑高体积百分比钨合金微结构及各相性质对复合材料有效力学性质的影响 ,从而架起工艺条件及组分与钨合金力学性能之间关系的桥梁 ,为分析高比重钨合金性能从理论上建立一套方法 ,从材料设计和制备的角度实现对这种材料性能优化提供一种方案。

摘要：为了探讨高精料饲喂产生lps对奶山羊血浆游离氨基酸重分配的影响及其机制,本研究选用奶山羊6只,随机分为2组,分别饲喂精粗比为4∶6(低精料组)和6∶4(高精料组)的日粮,交叉试验设计,分2期进行,每期14d。在试验第3周测定瘤胃液pH、血液中lps含量和游离氨基酸含量。结果表明,自第3周,高精料组山羊开始出现亚急性瘤胃酸中毒,外周血液中lps含量显著升高(P<0.05);血浆中各氨基酸含量均发生变化,表现为Glu、Ala含量极显著降低(P<0.01),Gln、Arg、Thr、Lys、总非必需氨基酸、总游离氨基酸、总生糖氨基酸均显著低于低精料组(P<0.05)。结果提示,饲粮中精饲料比例增加,血浆氨基酸发生重分配,其机理可能与瘤胃pH下降和血液中lps含量升高有关。

摘要：背景：未成熟树突状细胞（dendriti ccells，DC）可以诱导免疫耐受形成，在器官移植领域具有广阔应用前景。目前采用的诱导未成熟树突状细胞的方法仍存在一些不足，寻求新的诱导方法十分必要。目的：观察丁酸钠对人外周血来源的树突状细胞的成熟状态和免疫学功能的影响。设计：观察对比，体外细胞学实验。单位：中山大学附属第二医院肝胆外科。材料：人外周血样品取自中山大学身体健康的大学生志愿捐献者（年龄20—23岁），共5份，每份100mL，均在献血后2h内进行外周血单个核细胞和淋巴细胞分离。方法：实验于2006—09／2007—03在中山大学附属第二医院医学研究中心完成。①人外周血单个核细胞采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素4诱导成为未成熟树突状细胞。②诱导6d后，加入组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠1mmol／L诱导，以促成熟因子脂多糖1mg／L为对照；设不加促成熟因子为空白对照组。③在诱导0d时加入丁酸钠，6d时加入脂多糖再次刺激。主要观察指标：动态观察细胞形态学变化，流式细胞仪检测DC表型，FITC标记的Dextran检测DC内吞能力，采用酶联免疫吸附法检测白细胞介素12分泌，混合淋巴细胞反应检测DC刺激淋巴细胞增殖能力。结果：①DC形态：在丁酸钠作用下，DC聚集现象明显减少。②细胞表型检测结果：丁酸钠促成熟组常规方法诱导的未成熟DC的CD80，CD83，HLA-DR表达均低于脂多糖组，差异有显著性意义（P〈0．01）。采用丁酸钠法诱导的未成熟DC，在第6天时加入促成熟因子脂多糖后CD80，CD83，HKA-DR表达仍处于低水平。③DC内吞能力：常规方法诱导的未成熟DC，用lps诱导成熟后，其内吞能力均低于空白对照组和丁酸钠促成熟组，差异有非常显著性意义（P〈0．01）；而采用丁酸钠法诱导的DC，其内吞能力最强，高于其他各组，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。④DC分泌白细胞介素12：常规诱导法用lps诱导DC成熟后的白细胞介素12分泌水平高于对照组、丁酸钠促成熟组及丁酸钠诱导法，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。⑤DC诱导的MLR：常规诱导法用lps诱导的成熟DC刺激淋巴细胞的增殖能力显著高于对照组、丁酸钠促成熟组及丁酸钠诱导法，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。结论：丁酸钠可以抑制DC成熟，稳定诱导未成熟DC生成，该DC不能被促成熟因子激活，在诱导移植免疫耐受方面具有潜在应用前景。

摘要：本试验旨在探讨PRRSV/lps共刺激对小鼠雌二醇(E2)分泌的影响,以及探究苦参碱对共刺激引起E2变化的影响。试验分为空白组,PRRSV与lps共刺激组和苦参碱治疗组。给药7 d后采集血液,ELISA法测定血清E2水平;冻存卵巢组织,qRT-PCR检测StaR、CYP11a1、CYP19a1、3β-HSD、17β-HSD、Caspase-3、Bax和Bcl-2 mRNA的表达。结果表明,与空白组相比,PRRSV与lps共刺激组中血清E2含量降低(P0.05)。苦参碱可以明显升高由PRRSV/lps共刺激诱导的E2含量降低,显著升高CYP11a1 mRNA的表达(P<0.05)。结果提示,PRRSV/lps共刺激降低小鼠E2分泌,而苦参碱可以抑制共刺激诱导的E2分泌降低。