摘要：背景:研究已证实,磷酸肌醇3激酶特异性阻滞剂ly294002在体外具有剂量依赖性抑制细胞活性的作用,可以用于诱导肿瘤细胞凋亡,但ly294002对正常免疫系统的影响尚不清楚。目的:观察抗肿瘤药物ly294002对C57BL/6小鼠体内调节性T细胞的影响。设计、时间及地点:以调节性T细胞比例为观察对象,分组对比实验,于2008-08/12在广州南方医科大学珠江医院移植免疫研究所完成。材料:14只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分成实验组与对照组,每组7只。ly294002购自广州英韦创津公司。方法:实验组腹腔注射ly294002溶液200μL(0.1mg),对照组给予等体积PBS。10h后后眼眶静脉从采血,并分离脾脏、胸腺,制备单细胞悬液,流式细胞术检测小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞中的CD4+CD25highT细胞。主要观察指标:小鼠外周血、脾细胞和胸腺细胞中CD4+CD25highT细胞的比例。结果:实验组小鼠外周血、脾脏、胸腺中CD4+CD25highT细胞比例分别为(0.787±0.036)%,(0.921±0.063)%,(1.230±0.131)%,对照组小鼠外周血、脾脏、胸腺中CD4+CD25highT细胞比例分别为(0.640±0.030)%,(0.639±0.046)%,(0.857±0.077)%,实验组和对照组比较差异有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。结论:腹腔注射ly294002可提升小鼠体内调节性T细胞的比例,提示其有可能会抑制机体免疫反应,从而不利于治疗。

摘要：卵巢癌是妇女常见的恶性肿瘤之一，严重威胁女性的生命健康。紫杉醇作为临床化疗的一线用药，目前在卵巢癌的治疗中发挥重要作用。但是，大多数卵巢癌患者出现耐药和转移，这给治疗造成很大障碍。研究表明，磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol3-kinase，P13K）信号通路在多种肿瘤中被激活，这可促进肿瘤细胞的生长、增殖，抑制细胞凋亡，促进血管生成，引起肿瘤的侵润与转移，增强对化疗药物的抵抗能力。

摘要：目的探究ly294002对急性肾损伤(AKI)大鼠肾功能及细胞自噬的影响。方法将36只SD大鼠采用随机单位组设计分组法分为对照(control)组、假手术(sham)组、模型(model)组、ly294002预处理(I/R+ly294002)组,每组9只。ly294002预处理组连续腹腔注射ly294002(40μl/d),模型组腹腔注射等量无菌生理盐水,干预时间为14 d。14 d后除对照组外,其余大鼠均行手术,假手术组仅暴露双侧肾脏及肾蒂,模型组及ly294002预处理组进一步建立大鼠肾缺血再灌注损伤(RIRI)模型(缺血45 min,再灌注24 h)模拟AKI。建模成功后收集各组血液和肾脏,检测血清中肾损伤相关指标,观察肾脏组织病理改变,检测PI3K/AKT信号通路和自噬相关蛋白的表达情况。结果模型组血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)及肾损伤分子1(Kim-1)的浓度高于对照组及假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。ly294002预处理组SCr、BUN及Kim-1的浓度低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。ly294002预处理组可观察到RIRI大鼠肾脏组织病理改变如肾小管梗阻扩张、血管扩张充血、间质水肿得到减轻。模型组p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K的相对表达量和LC3Ⅱ、Beclin-1的表达高于对照组、假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。ly294002预处理组p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K的相对表达量和LC3Ⅱ、Beclin-1的表达低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论ly294002通过抑制PI3K/AKT信号通路,抑制了细胞自噬,肾脏损伤得到改善。这将为防治AKI提供一个新的思路。

摘要：目的研究淫羊藿苷(ICA)联合ly294002对人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株(ACC-M)细胞的促凋亡作用及机制。方法不同浓度ICA、ly294002作用ACC-M细胞24 h、48 h、72 h后采用噻唑兰比色法测定细胞的抑制率。筛选联合用药浓度并将细胞分为:A(阴性对照组,不加任何药物)、B[(ly294002抑制浓度(IC)_(50)),即阳性对照组]、C(ICA IC_(50))、D(ICA IC_(20)+ly294002 IC_(10))、E(ICA IC_(40)+ly294002 IC_(10))组;各组分别给予相应药物处理细胞48 h后,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,免疫印迹法检测各组细胞磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、核因子(NF)-κB蛋白表达水平。结果与A组相比,不同浓度ICA、ly294002对ACC-M细胞增殖均具有抑制作用。不同浓度ICA联合ly294002 IC_(10)均可抑制细胞增殖,抑制率与ICA浓度呈剂量依赖性(P<0.05)。干预48 h后,E组的细胞凋亡率高于B、C组(P<0.05),镜下可见各浓度药物组细胞均表现有典型的凋亡细胞形态学特征;E组p-AKT、NF-κB蛋白表达水平低于B、C组(P<0.05)。结论ICA联合ly294002可能是通过抑制p-AKT、NF-κB蛋白表达而促进ACC-M细胞的凋亡。

摘要：目的探讨血管生成素-1(Angiopoietin-1,Ang-1)蛋白对无血清DMEM培养基培养的结肠癌细胞(SW 1116)存活率的影响及其与PI3-′k inase/Akt通路的关系。方法将不同浓度的Ang-1蛋白作用于SW 1116细胞,用MTT法检测细胞增殖,根据实验结果选定Ang-1蛋白的后续实验浓度,设计出SW 1116细胞增殖抑制模型,分别向该模型中加入Ang-1及ly294002,应用免疫印记法分析相关蛋白(Tie-2、PI3K、Akt)的变化。结果 Ang-1组与无血清DMEM培养基组比较,Tie-2、PI3K、Akt三种蛋白在SW 1116细胞中的表达均增强,但仅Tie-2的表达有显著差异(P<0.01),ly294002组三种蛋白的表达均减弱(P<0.01,P<0.05)。结论较低浓度(0.05 mg/L)的Ang-1蛋白在结肠癌细胞中即有抗凋亡作用,且随着浓度的增加抗凋亡作用逐渐加强,当高于0.2 mg/L时,作用逐渐减弱,其诱导凋亡的机制可能与Tie-2/PI3-′k inase/Akt调节的通路有关,应用该途径的抑制剂ly294002可抑制结肠癌细胞的生长,实现抗肿瘤作用。