摘要：目的探讨mHCⅡ类分子转录激活因子(CⅡTA)的m1-rna对细胞表面mHCⅡ类分子表达的抑制。方法m1-rna是核糖核酸酶P的催化活性单位,设计并克隆针对CⅡTA第452、629位点的m1-rna(分别为m1-452-GS、m1-629-GS)及其相应的CⅡTA靶基因,分别插入pUC19、pGEm-7zf (+)载体,进行细胞外切割活性筛选。将细胞外切割作用明显的m1-629-GS亚克隆入psNAV载体(psNAV-m1-629-GS,pA629)并稳定转染ECV304细胞株,流式细胞术检测经典的mHCⅡ(HLA-DR、-DP、-DQ)类抗原表达,RT-PCR检测CⅡTA的mrna水平。结果pA629阳性ECV304细胞株与对照组比较,HLA-DR、-DP抗原表达分别降低了89.21%及92.31%;同时CⅡTA的mrna含量降低(P<0.05)。结论CⅡTA的m1-rna(m1-629-GS)降低了自身mrna含量,从而阻止其调控的mHCⅡ类分子的表达。

摘要：探讨mHC II类转录激活因子(CIITA)的m1-rna对细胞表面mHC II类分子表达的抑制。m1-rna是核糖核酸酶P的催化活性单位,设计并克隆针对CIITA第452、629位点的m1-rna(分别为m1-452-GS、m1-629-GS)及其相应的CIITA靶基因,分别插入pUC19、pGEm-7zf(+)载体,进行细胞外切割活性筛选。将细胞外切割作用明显的m1-629-GS亚克隆入psNAV载体(psNAV-m1-629-GS,pA629)并稳定转染HeLa细胞株,流式细胞术检测经典的mHC II类抗原(HLA-DR、-DP、-DQ)的表达,RT-PCR检测CIITA的mrna水平。在重组人γ干扰素诱导下,pA629阳性HeLa细胞株表面HLA-DR、-DP抗原表达分别降低了83.03%及89.91%;同时CIITA的mrna含量明显减少(P<0.05)。CIITA的m1-rna抑制了自身mrna含量,从而阻止其调控的mHC II类分子的表达,为移植物抗宿主病的研究提供了一种新方法。