摘要：目的:构建结肠癌转移相关基因1(metastasis-associated in colon cancer-1,macc1)小发卡RNA(small hair RNA,shRNA)的真核表达载体,观察其在卵巢癌细胞OVCAR-3中的表达。方法:设计、合成macc1特异性shRNA序列,插入载体p-super-EGFP-I中,重组载体转染OVCAR-3,半定量RT-PCR和western blot技术检测转染前后OVCAR-3细胞中macc1的表达。结果:成功构建macc1shRNA真核表达载体,转染后OVCAR-3细胞中macc1的表达受到显著抑制。结论:成功构建macc1特异性shRNA表达载体,为进一步研究macc1参与卵巢癌发生发展的机制奠定实验基础。

摘要：目的:探讨macc1基因与肾癌转移的相关性,及其表达降低对肾癌细胞侵袭能力的影响。方法:应用荧光定量PCR检测原发未转移肾癌和原发伴转移肾癌组织中macc1 mRNA的表达。设计并合成macc1基因特异性的siRNA,转染肾癌Caki-1细胞,检测转染后macc1蛋白的表达以及Caki-1细胞的侵袭能力。结果:原发伴转移肾癌组织中的macc1 mRNA表达较原发未转移肾癌明显增加(P<0.05)。siRNA-macc1能够明显抑制Caki-1细胞中macc1蛋白的表达(P<0.05)。macc1蛋白表达抑制的Caki-1细胞的侵袭能力明显降低(P<0.05)。结论:macc1基因与肾癌的转移相关,其表达抑制能够降低Caki-1细胞的侵袭能力。

摘要：目的探讨基因与脑胶质瘤的相关性及其表达改变对胶质瘤U87细胞凋亡和增殖能力的影macc1响。方法荧光定量PCR检测45例脑胶质瘤及相应癌旁组织中macc1基因的表达;设计并合成基因特异macc1性的siRNA,转染U87细胞;Western blot检测转染后macc1蛋白的表达;双标流式细胞法检测细胞凋亡;MTT法测定细胞生长抑制率。结果基因在脑胶质瘤组织中表达明显上调;转染基因特异性的siRNA后macc1蛋白表达明显降低,凋亡明显增加,生长抑制率明显增加,细胞增殖活力明显降低。结论 macc1基因的表达异常与脑胶质瘤的发生相关,抑制其表达能促进肿瘤细胞的凋亡同时抑制细胞增殖。

摘要：目的研究下调macc1表达对胃腺癌细胞株MGC-803生长作用的影响。方法设计并合成RNAi干扰片段,脂质体介导macc1-si RNA1(macc1-si RNA1组)和macc1-si RNA2(macc1-si RNA2组)转染MGC-803细胞,同时设非特异性干扰片段为对照组。应用q RT-PCR检测转染后各组macc1的m RNA表达,噻唑蓝比色实验、平板克隆形成实验和流式细胞周期实验检测RNAi转染后MGC-803细胞增殖能力的变化,Western blot检测转染后macc1、P21、CDK4、CCND1和c-myc蛋白的表达,并进行比较分析。结果与对照组相比,macc1-si RNA1组和macc1-si RNA2组macc1表达在m RNA及蛋白水平下降,细胞的增殖速度变慢,单克隆形成数量减少,细胞周期中G1期细胞的比例显著升高,P21的表达增加,macc1、CDK4、CCND1和c-myc的表达减少。结论下调macc1能使MGC-803细胞的细胞周期进程受阻,抑制细胞的增殖,macc1可以作为治疗胃癌的有效靶点。