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利用CRISPR-Cas9系统敲除小鼠黑色素瘤细胞系matp基因的初步研究: 收藏
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引用; 《中国比较医学杂志》2017年第4期27卷 52-55页; 作者：殷慧慧李丹李钰孙菲董施施孔江峰王洪宝曾林法云智孙兆增军事医学科学院实验动物中心北京100071; 目的利用CRISPR/Cas9系统,敲除小鼠黑色素瘤细胞系的matp基因,为matp基因的功能研究奠定基础。方法利用http://***/网站,设计针对matp的特异性引物,并将引物链接到pCAS9/gRNA1载体。将阳性载体转染小鼠黑色素瘤细胞系B16F10,利用无限稀...; 目的利用CRISPR/Cas9系统,敲除小鼠黑色素瘤细胞系的matp基因,为matp基因的功能研究奠定基础。方法利用http://***/网站,设计针对matp的特异性引物,并将引物链接到pCAS9/gRNA1载体。将阳性载体转染小鼠黑色素瘤细胞系B16F10,利用无限稀释的方法获得转染后的单克隆细胞株。提取不同细胞株的基因组,通过测序的方法进一步筛选出发生matp基因切割的细胞株,并利用Western-blot的方法验证matp的表达情况。结果成功获得了3株matp基因敲除的细胞株,Western-blot结果表明,该细胞株不表达matp蛋白。结论利用pCAS9/gRNA1载体,可以实现B16F10细胞系matp基因的敲除。; 来源：详细信息评论

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