摘要：目的:探讨扭转原肠胚形成同系物1基因(twisted gastrulation protein homolog 1,TWSG1)对胃癌mgc-803细胞增殖及凋亡的影响。方法:设计3条TWSG1基因相关的siRNA,将对数生长期mgc-803细胞分为空白对照组、阴性对照组、siRNA1干扰组、siRNA2干扰组和siRNA3干扰组,待细胞汇合率达70%～80%时分别转染空载体、连接siRNA1、siRNA2和siRNA3的载体。采用q PCR和Western blotting检测各组细胞TWSG1 m RNA和TWSG1蛋白的表达水平,筛选干扰效率最高的稳定细胞株。用CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,用流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果:各转染组细胞中siRNA1干扰效率最高。与空白对照组和阴性对照组相比,siRNA干扰组细胞TWSG1表达下调(P<0.05),其细胞增殖显著增加(P<0.05),凋亡显著减少(P<0.05)。结论:siRNA干扰mgc-803细胞中TWSG1基因的表达后,可促进细胞增殖、抑制细胞凋亡。

摘要：我们选用人胃癌mgc-803细胞为实验对象，设计合成针对Cdx2的小干扰RNA（siRNA）并转染mgc-803细胞，观察Cdx2基因表达下调后对细胞黏附能力以及PTEN表达的的影响。

摘要：目的研究敲低YTH结构域N^6甲基腺嘌呤(m^6A)RNA结合蛋白2(YTHDF2)对mgc-803人胃癌细胞的增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法用UCSC Cancer Browser下载癌症基因组图谱(TCGA)数据库筛查YTHDF2 mRNA在胃癌中的表达情况。设计并构建能够靶向敲低YTHDF2的短发夹RNA(shRNA)病毒载体;病毒感染mgc-803细胞,敲低YTHDF2水平后,实时荧光定量PCR检测YTHDF2 mRNA水平,Western blot法检测YTHDF2蛋白水平,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡。结果通过TCGA数据库查询发现YTHDF2在胃癌组织中高表达。成功构建YTHDF2敲低的稳定转染mgc-803细胞。与对照组相比,YTHDF2敲低后,明显抑制细胞增殖;G1期细胞明显增加,S期细胞明显减少;细胞凋亡率升高。结论敲低mgc-803胃癌细胞YTHDF2水平,抑制胃癌细胞增殖并促进其凋亡。

摘要：目的研究下调MACC1表达对胃腺癌细胞株mgc-803生长作用的影响。方法设计并合成RNAi干扰片段,脂质体介导MACC1-si RNA1(MACC1-si RNA1组)和MACC1-si RNA2(MACC1-si RNA2组)转染mgc-803细胞,同时设非特异性干扰片段为对照组。应用q RT-PCR检测转染后各组MACC1的m RNA表达,噻唑蓝比色实验、平板克隆形成实验和流式细胞周期实验检测RNAi转染后mgc-803细胞增殖能力的变化,Western blot检测转染后MACC1、P21、CDK4、CCND1和c-myc蛋白的表达,并进行比较分析。结果与对照组相比,MACC1-si RNA1组和MACC1-si RNA2组MACC1表达在m RNA及蛋白水平下降,细胞的增殖速度变慢,单克隆形成数量减少,细胞周期中G1期细胞的比例显著升高,P21的表达增加,MACC1、CDK4、CCND1和c-myc的表达减少。结论下调MACC1能使mgc-803细胞的细胞周期进程受阻,抑制细胞的增殖,MACC1可以作为治疗胃癌的有效靶点。