摘要：目的探讨叶酸在N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)致哈萨克族食管上皮细胞APE1、mgmt基因mRNA及蛋白表达中的作用。方法采用3×3析因设计将体外培养的哈萨克族食管上皮细胞暴露于不同浓度叶酸(0.00、0.40和0.80μg/ml)和MNNG(0.00、0.75和1.50μg/ml)的培养液中作用48、72和96 h后,采用RT-PCR法检测APE1、mgmt基因mRNA的表达水平,采用Western Blot法检测APE1、mgmt基因蛋白表达水平。结果随着叶酸浓度降低和MNNG浓度增加,APE1基因的mRNA及蛋白表达水平随着损伤的增加而增加,差异有统计学意义(P<0.01);mgmt基因的mRNA及蛋白表达水平则随损伤的增加而下降,差异有统计学意义(P<0.01)。结论叶酸浓度降低对MNNG致哈萨克族食管上皮细胞损伤有一定的促进作用,而保持充足的叶酸则对MNNG的损害起到一定的保护作用。

摘要：目的探讨mgmt(O6-methylguanine-DNA methyltransferase)基因异常甲基化的血浆检测方法和临床意义。方法首先对SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法进行改良设计研究,寻求最佳的实验方法和条件,然后利用改良的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法分别对肺癌患者和正常人的血浆进行异常甲基化mgmt基因检测。结果在反应体系中增加75℃30s这一步骤可有效消除非特异性扩增产物,使测量定量结果更加精确。18例肺癌患者中,鳞癌1例为阳性,占20%;小细胞肺癌1例阳性,占33.33%;腺癌4例阳性,占40%。结论利用改良的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法可以检测到肺癌患者血浆异常甲基化mgmt的存在;肺腺癌阳性率最高,提示不同肿瘤细胞基因表达存在很大差异;同时也为无创伤性诊断肺癌提供了一种具有临床实用价值的方法。