摘要：木薯块根淀粉葡聚糖链结构是决定淀粉品质的关键因素,可溶性淀粉合成酶Ⅲ(SSⅢ)是调控植物支链淀粉葡聚糖长链合成的关键酶,木薯有两个messⅲ的同源基因messⅲ-1和messⅲ-2。为了研究木薯messⅲ对木薯块根淀粉品质形成的影响,根据messⅲ-1和messⅲ-2的保守区段,本研究构建了messⅲ-1和messⅲ-2的双基因编辑载体。利用在线软件CRISPR-P v2.0同时设计靶标messⅲ-1和messⅲ-2的sg RNA,通过酶切连接构建重组pCAMBIAP1301-Cas9-messⅲ-gRNA质粒。将基因编辑载体转化农杆菌LBA4404后侵染木薯脆性胚性愈伤组织,筛选阳性脆性胚性愈伤组织,并提取其总DNA。通过PCR扩增靶点messⅲ-1和messⅲ-2的区段,并将扩增片段进行Sanger测序,分析其编辑的靶标位点。结果发现messⅲ-1和messⅲ-2靶标位点被成功编辑,本研究有助于进一步获得messⅲ基因突变体,以深入解析该基因在木薯淀粉合成通路中的作用。