摘要：目的构建慢病毒介导的具有特定二级结构的人microrna-338-3p（miR．338．3p）抑制剂并观察其对结直肠癌细胞侵袭转移能力的影响。方法由miRBase数据库查找获得miR-338-3p成熟序列，设计目的基因片段并人工合成；将miR-338-3p抑制剂序列和pLV-THM载体经双酶切后连接，产生pLV-THM-miR-338-3p抑制剂慢病毒表达载体，双酶切后测序鉴定，筛选阳性克隆；以pLV-THM-miR-338-3p抑制剂、pspAX2和pMD2．G质粒共转染包装细胞293T，包装产生慢病毒并测定滴度。流式细胞仪筛选建立稳定过表达miR-338-3p抑制剂的SW-620亚细胞株，利用实时定量逆转录聚合酶链反应（RT-qpCR）检测miR-338-3p表达，Westernblot检测其靶基因Smoothened（SMO）蛋白表达水平，Transwell小室穿透试验检测肿瘤细胞转移能力。结果经双酶切鉴定和测序证实，成功构建了包含miR-338-3p抑制剂的慢病毒表达载体，倒置荧光显微镜下观察可见包装细胞293T表达绿色荧光。稳定过表达miR-338-3p抑制剂的SW-620亚细胞株中，miR-338．3p表达水平显著低于阴性对照组（O．92±0．43比3．71±0．22，p〈0．01），SMO蛋白表达水平明显升高，且肿瘤细胞表现出侵袭转移能力的增强（细胞数78．6±6．9比23．7±4．2，p〈0．01）。结论成功构建了miR-338-3p抑制剂的慢病毒表达载体和稳定低表达miR-338-3p的SW-620亚细胞株，证实miR-338-3p可通过抑制结直肠癌细胞中SMO蛋白表达而抑制肿瘤细胞转移。