摘要：本实验利用干扰素诱导剂Poly(I:C)诱导鸽成纤维细胞,提取细胞总RNA,根据Gen Bank中公布的鸽基因组序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增白卡奴鸽mx基因全长编码区序列。结果表明:白卡奴鸽mx基因编码区长2 106 bp,编码701个氨基酸残基,推测蛋白分子量大小为79.7 ku,等电点为6.37;通过与Gen Bank中已登录的脊椎动物mx基因序列对比,核苷酸序列的同源性为54.0%~78.0%,氨基酸序列的同源性为41.3%~69.3%。本实验成功克隆了白卡奴鸽mx基因,证实其编码的蛋白具有脊椎动物mx基因共有的结构特征,为进一步研究白卡奴鸽mx基因的抗病活性及其作用机制奠定了基础。

摘要：旨在大肠杆菌中表达鸡抗病毒mx蛋白,为进一步研究该基因抗病活性奠定基础。本研究通过设计一对特异性引物,从已构建好的鸡mx基因真核表达载体pcDNA3.0-Mmx上扩增出mx基因开放式阅读框(2118bp),并将其编码区重组于原核表达载体PGEX-6P-1中,经酶切和序列鉴定分析后,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)和Rossetta-gami(DE3),并比较其表达效率。结果显示,经不同浓度IPTG诱导后,该基因在Rossetta-gami(DE3)中获得表达。SDS-PAGE检测结果显示,蛋白大小与预期结果相符,说明重组质粒pGEX-mx在大肠杆菌中成功诱导表达出鸡mx蛋白,为下一步鸡mx蛋白活性检测及抗体制备奠定基础。