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乳酸乳球菌nisin抗性基因nisi的克隆及作为筛选标记: 收藏
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引用; 《微生物学报》2009年第9期49卷 1229-1233页; 作者：罗立新王成华南理工大学生物科学与工程学院广州510006; 【目的】以nisi作为食品级选择标记构建大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭载体。【方法】根据GenBank报道的乳链菌肽nisin抗性基因nisi的序列,以pLEB590为模板,设计特异性引物,PCR扩增出nisi片段,经TA克隆、酶切鉴定及测序之后,亚克隆至大肠杆菌...; 【目的】以nisi作为食品级选择标记构建大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭载体。【方法】根据GenBank报道的乳链菌肽nisin抗性基因nisi的序列,以pLEB590为模板,设计特异性引物,PCR扩增出nisi片段,经TA克隆、酶切鉴定及测序之后,亚克隆至大肠杆菌-乳酸乳球菌穿梭载体pMG36e中,重组子命名为pMG36e-nisi,再将pMG36e-nisi电转化至对nisin敏感的乳酸乳球菌MG1363中。【结果】获得的重组菌MG1363/pMG36e-nisi在含有20IUnisin/mL的培养基中生长情况良好,遗传性能稳定,这表明nisi基因赋予了宿主菌MG1363对nisin的抗性。【结论】nisi可以作为筛选标记用于食品级表达载体的构建。; 来源：详细信息评论

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