摘要：目的:构建包含notch1胞内结构域的notch1-NICD真核表达载体及绿色荧光蛋白载体并转染食管鳞状细胞癌细胞株EC9706及Eca109,并对notch1-NICD1在食管鳞状细胞癌中的功能进行初步探索。方法:根据GenBank上的notch1-NICD序列设计扩增引物,由RT-PCR扩增NICD片段,测序鉴定,并通过Blast进行序列比对,然后回收目的片段并与真核表达载体pcDNA3.1(+)相连,构建notch1-NICD真核表达载体pnotch1-NICD1,同时将扩增的NICD与pEGFP-C1载体相连构建绿色荧光蛋白表达载体pEnotch1-NICD1,并转染EC9706及Eca109,观察notch1在细胞中的定位及其途径的激活状态。同时将pnotch1-NICD1真核表达载体转染EC9706及Eca109,用MTT法分别在24h、48h、72h、96h及120h观察外源性notch1片段的导入对EC9706及Eca109细胞增殖的影响。结果:通过RT-PCR获得1个notch1胞内区片段,并成功构建了包含notch1胞内区结构域的绿色荧光蛋白载体及真核表达载体。转染pEnotch1-NICD1后,notch1在胞质和胞核内均有表达,表明notch1信号通路被激活。此外,MTT结果表明转染notch1-NICD1片段的食管鳞状细胞癌细胞的增殖受到明显抑制(P<0.05)。结论:成功构建了notch1绿色荧光蛋白表达载体及pcDNA3.1(+)真核表达载体。外源notch1片段的引入能够明显抑制食管鳞状细胞癌细胞的增殖,提示notch1基因有可能成为治疗食管鳞状细胞癌的一个潜在的分子靶点。