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猪戊型肝炎病毒广西株orf2三段连续基因编码蛋白的表达及抗原性分析
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《中国兽医科学》2010年 第6期40卷 556-560页
作者:肖爱欢 赵武 梁家幸 何颖 李茂宁 秦毅斌 李斌 侯韶毅 苏乾莲 梁保忠 黄伟坚广西大学动物科学技术学院预防兽医学广西区重点实验室广西南宁530005 广西兽医研究所病毒研究室广西南宁530001 
为了确定猪戊型肝炎病毒(HEV)orf2抗原性片段的分布,参考中国T1株序列设计套式引物,从新鲜猪粪中扩增出HEV部分基因片段,长1725bp,位于orf2205~1929bp之间,命名为HEVorf2-A。根据HEVorf2-A序列设计了3对引物,分别扩增HEVorf2-A三段...
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猪圆环病毒2型武威株orf2基因序列分析及真核表达载体的构建
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《中国兽医科技》2005年 第9期35卷 689-693页
作者:马友记 柳纪省 赵兴绪中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046 甘肃农业大学动物医学院甘肃兰州730070 
根据GenBank中猪2型圆环病毒(PCV-2)的核酸序列,设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪组织病料中扩增出了orf2基因,将其克隆到pMD18-T载体上,筛选获得了重组质粒pMD18-T-orf2.对此重组质粒进行序...
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三个猪戊型肝炎病毒orf2基因连续片段核酸疫苗的构建
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《中国兽医科学》2013年 第10期43卷 1059-1066页
作者:李斌 苏乾莲 赵武 秦毅斌 梁家幸 肖爱欢 卢冰霞 李莹莹 何颖 段群棚 姜佳佳 梁保忠广西兽医研究所广西南宁530001 广西畜禽疫苗新技术重点实验室广西南宁530001 广西大学动物科学技术学院广西南宁530005 
为了研制猪戊型肝炎(HE)基因工程疫苗,设计引物扩增猪戊型肝炎病毒(HEV)的基因片段LB1、LB2、LB3,分别与真核表达载体pEASY-M1Expression Vector直接进行T-A连接,构建得到了重组真核表达质粒pEASY-LB1、pEASY-LB2、pEASY-LB3。将这3个...
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猪圆环病毒2orf2基因的克隆及其真核表达载体的构建
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《黑龙江畜牧兽医》2009年 第8期 72-73页
作者:陈圆圆 孙彦婷 邝爱丽 彭志锋 刘春生 郑鹿平 刘慧敏 王川庆河南农业大学牧医工程学院疫病检测中心河南郑州450002 
为了给猪圆环病毒2型的诊断和基因工程疫苗的研究奠定基础,试验根据GenBank中猪圆环病毒2型的核酸序列设计了1对引物,采用PCR方法从疑似断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的死亡仔猪病料组织中扩增出了orf2基因,将其克隆到pMD18-T载体上,...
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应用在大肠杆菌中表达的猪2型圆环病毒orf2蛋白建立一种ELISA诊断方法
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《畜牧兽医学报》2004年 第6期35卷 689-693页
作者:琚春梅 陈焕春 刘正飞 曹胜波 何启盖华中农业大学动物医学院动物病毒室武汉430070 
根据GenBank中猪2型圆环病毒(PCV2)序列(AY035820),设计1对引物,并以包含PCV2全基因组的重组质粒pT-PCV为模板,扩增出含orf2全基因的片段(709bp),回收PCR产物,将其克隆入pMD18-T载体,获得重组质粒pTorf2,并对其进行序列测定。重组质粒经...
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猪附红细胞体orf2的全基因合成、表达与鉴定
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《中国兽医学报》2011年 第8期31卷 1184-1188页
作者:周栋 成子强 刘建柱 张利 刘海涛 刘永夏 周川 柴同杰山东农业大学动物医学院山东泰安271018 
通过重叠区扩增法(PCR-based accurate synthesis,PAS)人工合成猪附红细胞体orf2基因,并使其在大肠杆菌(DE3)中高效表达。根据GenBank注册的AJ504999的orf2基因序列,选择大肠杆菌偏爱的密码子,设计并合成11对寡核苷酸片段,用PAS方法,人...
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猪圆环病毒2orf2基因的原核表达
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《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2010年 第5期38卷 8-12页
作者:敬晓棋 吴发兴 丛丽媛 张佩君 陈德坤西北农林科技大学动物医学院陕西杨凌712100 榆林学院生命科学研究中心陕西榆林719000 中国动物卫生与流行病学中心动物流行病学监测室山东青岛266032 陕西省教育学院生物系陕西西安710061 
【目的】构建猪圆环病毒2型(PCV2)orf2原核表达质粒载体,高效重组表达PCV2壳蛋白Cap,为进一步建立PCV2 ELISA的检测方法及Cap蛋白单克隆抗体的制备研究奠定基础。【方法】根据猪圆环病毒2orf2基因序列设计带有BamHⅠ、HindⅢ酶切位点...
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猪戊型肝炎病毒orf2蛋白C端主要抗原表位区的原核表达
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《动物医学进展》2010年 第1期31卷 24-27页
作者:冉旭华 闻晓波 王密 李冬野 侯喜林黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医学省重点实验室黑龙江大庆163319 
利用分子生物学软件分析GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株orf2的氨基酸序列,确定了其C端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了一对特异性引物,RT-PCR扩增该区域,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-orf2C,然后...
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猪圆环病毒Ⅱ型orf2部分基因的克隆及原核表达
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《吉林农业大学学报》2009年 第6期31卷 759-762页
作者:王伟利 边少国 肖成蕊 孟庆峰 刘和平吉林出入境检验检疫局长春130062 辽宁益康生物制品有限公司沈阳111000 
根据发表的猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)orf2基因序列,设计合成1对特异性引物,从分离到的PCV2吉林株(JL01)中扩增出PCV2 orf2579 bp的核苷酸片段,克隆到表达载体pET-32a中,经BamHⅠ和HindⅢ酶切及序列分析获得阳性重组表达质粒pET-32a-orf2。...
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猪圆环病毒2orf2编码基因真核表达载体的构建及表达
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《中国病毒学》2003年 第4期18卷 367-370页
作者:谈国蕾 胡志华 芦银华 陈德胜 陈溥言南京农业大学动物医学院江苏南京210095 
根据GenBank中猪圆环病毒2型(PCV-2)orf2基因序列,设计了1对引物,应用PCR从含有PCV-2的PK-15细胞中扩增出orf2基因,将其克隆入pSecTag2载体中,构建了pSecorf2载体。又设计一条含信号肽序列的上游引物,以pSecorf2为模板,扩增出含信号肽...
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