T=题名(书名、题名),A=作者(责任者),K=主题词,P=出版物名称,PU=出版社名称,O=机构(作者单位、学位授予单位、专利申请人),L=中图分类号,C=学科分类号,U=全部字段,Y=年(出版发行年、学位年度、标准发布年)
AND代表“并且”;OR代表“或者”;NOT代表“不包含”;(注意必须大写,运算符两边需空一格)
范例一:(K=图书馆学 OR K=情报学) AND A=范并思 AND Y=1982-2016
范例二:P=计算机应用与软件 AND (U=C++ OR U=Basic) NOT K=Visual AND Y=2011-2016
摘要:以‘徐稻4号’为材料,构建oscams的瞬时表达载体,利用生物信息学和RT-PCR方法设计oscams定量引物5个,鉴定参与ABA诱导的oscams基因并分析其生理功能,为进一步揭示ABA信号转导核心组分的研究奠定基础。结果显示:(1)水稻oscams的5个家族基因的CDS等长,均为450bp,ABA(100μmol·L^(-1))处理能够明显诱导oscam1-1和oscam1-2的表达。(2)利用瞬时表达载体将表达荧光蛋白的oscam1-1-YFP和oscam1-2-YFP通过PEG方法转化到原生质体中,激光共聚焦分析显示,这2个基因均定位于细胞核、细胞质和细胞膜中;并构建了oscam1-1和oscam1-2的干扰载体dsoscam1-1和dsoscam1-2。(3)经ABA诱导的水稻原生质体抗氧化保护酶APX和SOD活性分别显著提高35%和31%;原生质体瞬时表达和瞬时沉默体系分析表明,oscam1-1和oscam1-2均能够影响抗氧化保护酶APX和SOD的活性,其中原生质体中瞬时过表达这2个基因对APX和SOD活性上调达到1.15~1.45倍,瞬时干扰这2个基因对APX和SOD活性下调达到25%~30%。(4)外源H_2O_2(10mmol·L^(-1))预处理水稻幼苗可诱导oscam1-1和oscam1-2基因表达量上调,并且oscam1-2能够诱导水稻原生质体中H_2O_2的积累。(5)原生质体瞬时表达分析发现,在水稻原生质体中瞬时表达oscam1-1和oscam1-2可分别诱导OsrbohB和OsrbohE的表达;而且在水稻原生质体中瞬时表达OsrbohB和OsrbohE可分别诱导oscam1-1和oscam1-2的表达,表明oscams与Osrbohs之间存在正反馈调节机制。研究表明,oscam1-1和oscam1-2为水稻参与ABA信号转导中具有调控抗氧化保护作用的同源基因;oscam1-1和oscam1-2不仅受ABA诱导,也受H_2O_2诱导,而且ABA是通过H_2O_2进行调控。
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