摘要：利用基于α-溶血素(α-HL)的纳米通道单分子检测技术在单分子水平上探测位于肿瘤抑制蛋白p53 DNA结合域的多肽分子(p53-p)与含有p21waf1/cip1基因结合域的双链DNA(B40)之间弱相互作用.在电场力的作用下,单个p53-p/B40复合物被α-HL纳米通道捕获并限制在其前庭中.通过空间限域作用,p53-p与B40之间的弱相互作用被放大为具有显著电压依赖性的复合物-α-HL间强烈的相互作用,从而产生极易分辨的离子流特征阻断信号.统计分析特征阻断信号显示p53-p与B40之间的弱相互作用使得B40产生微小的构型变化.分子对接模拟进一步证明,p53-p能够插入B40的小沟并使得小沟间距变窄.因此,基于α-HL的纳米通道单分子检测技术可以作为研究单个生物大分子间弱相互作用的超灵敏分析方法.

摘要：p53蛋白是一种肿瘤抑制因子,是人体细胞内对抗癌症最有效的天然防御物质之一,同时也是最易发生突变的蛋白质之一。野生型p53蛋白能够调控靶基因的转录,并广泛参与蛋白质相互作用,这与它内在复杂的三维空间结构分不开。因此,本文综述了p53蛋白个体结构域和全长蛋白质结构研究的概况,总结了p53突变与肿瘤发生的相关研究,同时还介绍了以p53为靶点的药物设计的新进展。

摘要：用免疫组化方法对２８例食管癌活检标本组织中ｐ５３蛋白表达情况进行了检测，并观察了其与临床放射治疗效果的关系。结果：食管鳞状细胞癌术前活检标本ｐ５３蛋白阳性表达率为４６．４％，放疗采用常规设计，放射治疗效果为ｐ５３阳性组ＣＲ４６％，ＰＲ１５％，ＰＤ３９％；ｐ５３阴性组ＣＲ５３％，ＰＲ４７％，ＰＤ０％。ｐ５３蛋白阳性者放疗疗效较阴性者差。结果表明：ｐ５３蛋白可以作为预测食管鳞癌放疗效果判断的参考指标之一。

摘要：背景:研究显示高压氧疗法在运动损伤与疲劳恢复方面具有较好的应用效果,但其机制尚不清楚。目的:观察高压氧对递增负荷跑台运动后大鼠腓肠肌p53、Bcl-2蛋白表达及细胞凋亡的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-03/05在苏州大学运动人体科学实验室完成。材料:2个月龄雄性SD大鼠24只,随机分为3组,安静对照组、递增负荷训练组、高压氧恢复组,每组8只。方法:递增负荷训练组:坡度10%,递增负荷训练,第1～4周,每天20m/min运动10min,25m/min运动10min,30m/min运动10min,35m/min运动10min。第5～8周,每天20m/min运动10min,25m/min运动10min,30m/min运动20min,35m/min运动20min。高压氧恢复组:运动方案相同,运动后即刻用0.2Mpa压力的高压氧恢复60min。安静对照组自由喂养,不进行训练。递增负荷训练组末次运动后1h、高压氧舱恢复组恢复1h及相应安静对照组分批麻醉处死,快速取腓肠肌立即用体积分数为0.1甲醛固定,制作切片。主要观察指标:①苏木精-伊红染色观察各组大鼠骨骼肌细胞凋亡情况。②免疫组织化学检测各组大鼠骨骼肌细胞p53与Bcl-2蛋白表达情况。结果:24只大鼠进入结果分析。①递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞凋亡数量增多,经高压氧恢复后细胞凋亡数量减少。②递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞p53蛋白表达增多,经高压氧恢复后表达显著减少。③递增负荷训练组大鼠骨骼肌细胞Bcl-2蛋白表达增多,高压氧恢复后未见减少。结论:高压氧能够抑制递增负荷训练大鼠骨骼肌p53蛋白的表达,减少运动导致的大鼠骨骼肌细胞凋亡的发生。

摘要：本文基于Hill动力学与Michaelis-Menten方程,建立理论模型研究肝癌(HCC)进展过程的微环境中,糖原合酶激酶3(GSK3)介导的胰岛素对糖原代谢的抑制调节,以及p53蛋白恢复调节糖原代谢异常的作用.分析了胰岛素激活AKT激酶影响GYS2磷酸化/去磷酸化转变的昼夜节律性,以及p53通过抑制AKT,对GYS2磷酸化/去磷酸化转变的昼夜节律性异常的调节恢复特性.研究发现,胰岛素激活并提升AKT的表达水平,经过AKT的催化作用,GSK3的表达被抑制减弱,进而增强了GYS2的磷酸化和失活.在胰岛素浓度较低的情况下,GYS2去磷酸化激活的昼夜节律性会被改变,进而改变了GYS2昼夜节律的合成规律.在较高胰岛素浓度条件下,去磷酸化的GYS2(dGYS2)随时间演变的周期振荡性会被极大地改变,GYS2昼夜节律的合成规律被破坏.改变p53的表达水平,我们发现,p53对较低和较高胰岛素浓度条件下dGYS2异常的昼夜节律演化性,有明显的调节恢复作用.理论结果符合实验,并进一步分析了GSK3介导的胰岛素调节GYS2磷酸化/去磷酸化转变的昼夜节律性的调节机理,以及p53对GYS2磷酸化/去磷酸化转变异常的调节恢复特性,进而揭示了HCC发生发展的一种致癌、抑癌机理,可为设计阻断致癌转变的通路治疗方案提供理论依据.

摘要：基于分子动力学模拟方法研究了R249S、R248W和G245S突变对p53-DNA结合域肽段(残基230-258)结构的影响.采用GROMACS软件包和GROMOS43A1分子力场,分别对野生型wtp53肽段、单点突变型p53-R249S肽段、两点突变型p53-R249S/R248W肽段和三点突变型p53-R249S/R248W/G245S肽段进行了4组独立的分子动力学模拟,每组体系模拟时间为500ns.研究结果表明:R249S单残基突变影响肽段残基形成二级结构的情况,但不改变肽段三维结构的模式,同时使该肽段结构相对稳定;R249S和R248W两残基同时突变会加剧R249S突变对肽段的影响,同时导致三维结构发生较大变化,构象弯曲呈现双turn结构,肽段稳定性进一步增大;G245S突变对肽段的影响与R249S和R248W同时突变对其结构的影响相反,在两残基突变的基础上,G245S突变会使原突变引起的变化减弱甚至消失,同时使得该肽段结构稳定性减小.该研究对认识肿瘤致病分子机制和设计新药物有重要意义.

摘要：探讨海湾扇贝多肽(polypeptide from bay scallop,pBS)对小鼠H22肝癌移植瘤的抑瘤作用及机制。将50只KM小鼠随机分为正常对照组、H22肝癌模型组和pBS低、中、高剂量组共5组,按试验设计进行体内灌胃试验。结果显示,低、中、高剂量组的抑瘤率分别为28.16%、41.93%和84.00%,具有量效依赖趋势。与模型组相比,三剂量组小鼠血清中突变型p53、Survivin、8-iso-pGF2α和MDA的水平均有所降低,而IL-2、GSH-px、SOD和TNF-α的水平均有所升高,且中剂量组较其他两组效果更明显;三剂量组小鼠肝脏组织提取液呈现相同变化趋势。肿瘤组织病理学观察也表明pBS有较好的抗肿瘤生物学效应。pBS对小鼠肝癌H22细胞具有明显的抑制作用。

摘要：目的从肿瘤抗原的全长氨基酸序列中预测肿瘤抗原肽，据此指导肿瘤肽疫苗的设计和制备。方法采用基序（ｃｏｎｓｅｎｓｕｓｍｏｔｉｆ）预测法，经计算机ＰＥＰＭＯＴＩＦ软件预测含点突变的小鼠ｐ５３蛋白肽，并建立一个计分系统来估测预测肽与ＭＨＣⅠ类分子结合的可能性，进一步通过ＭＨＣⅠ类分子－肽结合试验和ＭＨＣⅠ类分子－肽结合稳定性试验检测它们与ＭＨＣⅠ类分子的结合力和亲和力。结果预测了３条肽，其中ｍｐ５３Ｐ１３２Ｆ（ＬＮＫＬＦＦＱＬ）能与Ｈ－２Ｋｂ结合而不与Ｈ－２Ｄｂ结合；ｍｐ５３Ｐ２４６Ｓ（ＭＧＧＭＮＲＳＰＩＬ）和ｍｐ５３Ｐ２７０Ｃ（ＧＲＤＳＦＥＶＣＶ）既不与Ｈ－２Ｋｂ结合也不与Ｈ－２Ｄｂ结合。肽与ＭＨＣⅠ类分子之间的结合与用计分系统计算的肽积分高低有关，即高分值的肽能与相应的ＭＨＣⅠ类分子结合。结论计算机ＰＥＰＭＯＴＩＦ软件配合肽计分是简便有效的ＭＨＣⅠ类分子结合肽预测法。

摘要：人乳头瘤病毒(Human papillomavirus,HpV)是一类无包膜的小DNA病毒,主要感染人皮肤上皮细胞和黏膜,持续感染HpV会引起良性和恶性肿瘤,如尖锐湿疣和宫颈癌等多种疾病。HpV早期蛋白E6是引起宿主细胞发生恶性转化的关键致癌蛋白,其参与调节宿主细胞内多个关键的生理生化过程,如促使抑癌蛋白p53的降解、激活端粒酶和降解细胞凋亡相关蛋白Bak(Bcl-2 homologous antagonist/killer)等,进而干扰宿主细胞的生长因子依赖性、细胞凋亡、细胞转录、DNA损伤反应、细胞周期和宿主细胞分化等一系列生命活动。因此,分析阐述HpV致癌蛋白E6的结构与功能,有助于阐明HpV诱发宫颈癌等恶性肿瘤的分子机理,为今后设计治疗性HpV疫苗奠定理论基础。本文就HpV致癌蛋白E6的结构及其生物学功能进行综述。

摘要：p53抑癌通路在抑制肿瘤形成过程中起重要作用，同时发挥着诱导凋亡、控制细胞周期生长等重要作用，人类约50％的肿瘤发生存在p53蛋白失活。癌基因MDM2编码的细胞因子是p53应激通路重要的自体反馈负性调节因子。任何p53和MDM2基因组水平的变异，都有可能破坏p53通路的平衡，阻碍其功能的正常发挥，最终与细胞转化和肿瘤发生有关。本研究采用自然人群为基础的病例对照研究设计，旨在分析明确p53基因多态性与国人结直肠癌发病的相关性。