摘要：根据已测得的卡氏住白虫ITS_2序列 ,在 3’端设计一种特异引物 ,另外采用一个位于 5’端的保守引物 ,建立了鸡卡氏住白虫病的pcr诊断方法。特异性试验和敏感性试验表明 ,该诊断方法与其他虫体如疟原虫、弓形虫、微孢子虫、球虫等无交叉反应性 ,能检测的卡氏住白虫最低DNA浓度为 10 0 0fg 。

摘要：建立一种鹦鹉幼稚病(BFD)pcr诊断方法,为临床快速确诊鹦鹉幼稚病提供技术手段。参考GenBank中公开的BFDV基因组序列,设计了2对用于阳性质粒构建引物和1对检测引物,采用套式pcr从临床疑似病料中扩增BFDV VP1基因,构建VP1基因阳性质粒,以阳性质粒为模板,优化检测引物扩增体系与条件,进行灵敏度试验、特异性检测和临床样品检测,挑选3份不同地区阳性样品测序验证。结果显示,成功构建了BFDV VP1基因阳性质粒pGEM-T-VP1,建立的pcr检测方法检测下限为105.8copies/μL。用该方法检测时仅能以pGEM-T-VP1为模板扩增到目的条带,检测5种常见禽病毒均为阴性。应用建立的方法对75份疑似病料进行检测,结果19份为阳性,阳性率为25.3%。测定了3株不同地区BFDV流行毒株VP1基因片段序列,比对分析发现核苷酸序列同源性为99.4%~100%,在基因进化树上这3株病毒处在一个独立的分支上,显示出一定的地域特征。成功建立了一种灵敏度高、特异性好的BFD pcr诊断方法,应用于临床诊断显示出良好效果。

摘要：Ⅰ型禽副粘病毒(Avian Paramyxovirus-1,APMV-1)是副粘病毒科副粘病毒属成员,为不分阶段的单股副链RNA病毒,引起鸡、鸭、鹅、鸽、孔雀等多种禽类新城疫(ND),造成严重危害[1],鸽Ⅰ型禽副粘病毒病又称为鸽瘟或鸽新城疫,自从20世纪80年代初,在深圳及珠海拱北动检所先后从进口种鸽中发现本病以来,目前已普遍存在于我国各养鸽地区,不但对养鸽业的发展构成严重损害,一直是各类鸽病中发生频率最高、危害性最大的一种传染病[2],该病在肉鸽中可造成80%死亡率[3],同时,该病主要呈慢性经过,耐过病鸽多出现神经症状,严重影响生产性能[4],对该病的快速诊断也成为亟待解决的问题,朱金凤、岳华等根据鸡新城疫中、强毒株F基因裂解位点序列,设计引物和探针建立了可快速检测鸡新城疫病毒(NDV)中、强毒株的荧光定量RT-pcr方法(RRT-pcr),该方法可在4 h内从人工和自然感染鸡源中、强毒株样本中检出NDV RNA,利用该方法对鸽新城疫进行诊断,探索该方法用于本病快速诊断的可行性.

摘要：试验根据坏死梭杆菌白细胞毒素基因序列的特异性,设计1对引物FLP并建立了pcr检测方法。试验结果表明,引物FLP具有相对较高的特异性和敏感性,其敏感性达到了48.5pg。对现地采集奶牛蹄部病料进行pcr检测,发现引物FLP具有很好的特异性,能够准确诊断出坏死梭杆菌的存在。

摘要：根据已报导的鸡传染性喉气管炎病毒（ＩＬＴＶ）的基因序列及引物设计原则，设计且合成了一对引物，建立了ＩＬＴＶ的ＰＣＲ诊断方法。本方法具有简便、快速、敏感性高、特导性强的特点。

摘要：2014年2月,吉林地区某猪场饲养的约150头育肥猪陆续发病,临床以呕吐、腹泻和脱水为特征。笔者根据临床症状,初步诊断为猪流行性腹泻病。为进一步确诊,根据已有的PEDV病毒基因,自行设计引物,对患病猪进行pcr诊断。结果表明,该猪场感染了猪流行性腹泻病毒。

摘要：从送检鹿病料中分离出一株致病菌,对病原体进行了生物学特性鉴定,并利用设计的特异性引物进行了pcr诊断,最终确定为鹿快疫。本文为腐败梭菌病的快速诊断、流行病学调查建立了方法。

摘要：自八十年代以来,随着pcr技术的兴起,pcr诊断亦逐步应用到医学、兽医学的病原诊断,并具有独到的优越性。目前用pcr方法诊断伊氏锥虫病尚属空白,本研究旨在建立伊氏锥虫病诊断方法。 我们参照国外有关报导,设计并合成DNA扩增引物一对:5′-TGCAGACGACCTGACGCTACT-3′,5′-CTCCTAGAAGCTTCGGTGTCCT-3′。样品处理采用虫血加裂解液,离心后弃上清,用pcr缓冲液洗后,可直接用于DNA扩增:每个样品加水至10μl,加石腊油覆盖,100℃20分钟后,置反应温度93℃。

摘要：为建立羊嗜血支原体(***)病快速检测方法,本实验根据GenBank中登录的羊*** 16S rRNA基因序列设计一对引物,以山羊和绵羊***基因组DNA为模板,建立*** pcr检测方法,并进行特异性、敏感性及临床应用试验。结果显示,建立的*** pcr检测方法扩增片段大小为508 bp,与GenBank中***参考株同源性达99%以上,该方法与猪嗜血支原体、牛嗜血支原体等病原体无交叉反应,最低检测40个拷贝的DNA;通过对延边地区60份山羊和绵羊血液样本的检测结果表明,建立的pcr检测方法具有特异、敏感、准确等优点,完全适用于***的检测。

摘要：为建立气肿疽梭菌(Clostridium chauvoei)的快速检测方法,根据Gen Bank中气肿疽梭菌细胞毒素Cct A基因序列(登录号:JQ692583.1)设计了1对引物,以气肿疽梭菌标准株C54-1全基因组DNA为模板,建立了牛气肿疽梭菌的pcr检测方法,并进行了特异性、敏感性试验。结果表明,建立的气肿疽梭菌pcr检测方法扩增出的片段大小为501 bp,与Gen Bank上气肿疽梭菌的同源性达99.4%,且该方法与D型产气荚膜梭菌、E型产气荚膜梭菌、腐败梭菌和巴氏杆菌等病原体无交叉反应,最低检测浓度为12.30 fg/μL。结果表明,建立的pcr检测方法具有特异、敏感、高效等优点,与其他诊断方法相比更适用于气肿疽梭菌的诊断。