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猪圆环病毒Ⅰ型orf1基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达: 收藏
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引用; 《中国兽医科学》2007年第8期37卷 666-669页; 作者：马红艳蒋智勇孙丽华郝永清宋长绪内蒙古农业大学动物科学与医学学院内蒙古呼和浩特010018 广东省农业科学院兽医研究所广东广州510640; 根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(pcv1)orf1基因序列,设计合成了1对引物,对pcv1 orf1基因进行PCR扩增,将扩增出的orf1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-orf1。测序分析表明,克隆的orf1与广东分离株DQ659154的...; 根据GenBank中猪圆环病毒Ⅰ型(pcv1)orf1基因序列,设计合成了1对引物,对pcv1 orf1基因进行PCR扩增,将扩增出的orf1基因(939 bp)克隆入pMD18-T载体,将筛选获得的重组质粒命名为pMD-orf1。测序分析表明,克隆的orf1与广东分离株DQ659154的核苷酸序列同源性高达99.6%,推导的氨基酸序列同源性为99.4%。将orf1双酶切产物插入原核表达载体pET-41a,得到的重组子命名为pET-orf1。用IPTG进行诱导表达,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-blot分析,结果表明,pcv1orf1在pET-41a中获得了高效融合表达,其表达蛋白的分子质量约为67.6 ku。; 来源：详细信息评论

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