摘要：以玉米自交系郑58基因组DNA为模板,设计了2对特异性引物,分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(pepc)启动子及其全长编码序列,利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体p CAMBIA-1391Z上,并对重组子进行测序验证。结果表明,该pepc启动子序列与Gen Bank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%,片段长1 200 bp;全长编码序列同源性为97.90%,片段长6 330 bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体p CAMBIA-1391Z,利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个PCR片段连接,测序结果与预期序列一致,表明成功构建了p CAMBIA-1391Z-pepc植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论,以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C4型pepc基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列。

摘要：玉米C4光合关键酶pepc基因在玉米C4光合作用中起到重要作用,根据已测序的玉米C4-pepc基因序列,设计2对带限制性内切酶位点的特异性引物,以pBI121 C4-pepc质粒DNA为模板,PCR扩增得到2个C4-pepc基因片段。再将正向和反向两个片段分别经双酶切后插入植物表达载体pTA7002的XhoI和SpeI酶切位点之间,从而构建了以玉米C4-pepc基因为靶标的RNAi植物表达载体p7002-Z-F。载体质粒经酶切鉴定正确后通过冻融法转入根癌农杆菌EHA105中,为后续探讨干扰载体的干涉pepc基因表达效果奠定了基础。

摘要：根据GenBank中的Ghpepc1(登陆号:AF008939)的开放阅读框设计引物,运用PCR技术分别得到棉属16个种的pepc同源基因全长序列。序列比对结果表明,核苷酸和氨基酸的序列差异除长萼棉外分别是0.3%～9.8%和0.2%～18.8%。利用核苷酸序列构建的NJ和ME系统进化树对它们的亲缘进化关系进行了分析,其中陆地棉和海岛棉、草棉和亚洲棉、瑟伯氏棉与雷蒙德氏棉等分别聚为一类,结果与前人按染色体组型对棉花的分类结果基本一致,并且从本结果可推测出四倍体棉种可能由草棉和瑟伯氏棉的染色体组复合而成。