摘要：目的构建表达细胞转录因子 pparγ的 RNA 干扰(RNAi)质粒,为研究 pparγ参与的细胞信号通路以及 pparγ为靶点的基因治疗提供稳定转染的 RNA 干扰质粒。方法选取pparγ基因的 19 nt 特异性序列,设计针对 pparγ的 shRNA 序列,应用基因重组技术克隆到 pSilencer 1.0-U6表达载体中,用 EcoR I、Apa I 进行双酶切和 DNA 测序鉴定重组克隆 , 在脂质体的介导下将包含 pparγ基因的 RNAi 重组载体转染前列腺癌细胞 PC-3。转染 48 h 后 , 收集细胞裂解液,Western blotting 分析对照组与转染组 pparγ蛋白的表达水平。结果双酶切证实 shRNA 正确插入 pSilencer 1.0-U6 质粒,DNA 测序证实插入的序列正确;含 pparγ基因的 RNAi 载体转染前列腺癌细胞 PC-3 细胞成功;Western blotting 结果显示,与空质粒对照组相比,转染组细胞 pparγ表达下调。结论成功构建含人 pparγ基因的 RNAi 载体,为研究 pparγ参与的细胞信号通路提供了稳定转染的 RNA 干扰质粒。同时,阻断pparγ的信号通路将为基因治疗提供一个较好的靶点,研究结果为以 pparγ为靶点的基因治疗提供了有利工具。

摘要：研究背景：伴有心血管危险因素的患者有内皮功能障碍，是导致动脉粥样硬化发病机制的关键因素之一，在糖尿病患者中应用四氢噻唑产生了多种抗动脉粥样硬化的作用，本研究证实匹格列酮在伴有心血管危险因素的非糖尿病病人中提高内皮功能的假设。方法和结果：研究采用随机，双盲，安慰剂对照，交叉设计。人选80名同时伴有高血压和高胆固醇血症的患者。胰岛素敏感性用定量胰岛素敏感检测指数（QUICK）评价。