摘要：为探明贵州省近几年引起猪病毒性腹泻两个主要病原PEDV与porv的变异情况,本研究对贵州省贵阳市、遵义市、安顺市、黔东南洲等5个地（州市）26个规模化养猪场采集了213份疑似腹泻的粪便样品,采用实验室建立的PEDV、TGEV和porv三重RT-PCR检出PEDV阳性的病料12份和porv阳性病料4份。根据GenBank登录的PEDV和porv基因序列,分别设计PEDV M基因和porv VP7基因特异性引物,扩增目的基因、克隆、测序和遗传进化分析。结果显示：成功克隆了12株PEDV M基因（681 bp）和4株porv的VP7基因（981 bp）,M基因核苷酸及推导的氨基酸同源性分别在98.1%～100%和98.2%～100%之间,与国内外参考毒株核苷酸及氨基酸同源性分别在97.4%～100%和97.3%～100%之间;VP7基因核苷酸及推导的氨基酸同源性分别为95.5%～99.7%和96.9%～99.7%,与国内外参考毒株核苷酸及氨基酸同源性分别为71.9%～95.1%和72.7%～99.1%。贵州省PEDV地方流行株与疫苗株CV777、Attenuated DR13亲缘关系较远,porv地方流行株与G4型毒株Gottfried、HeN4等属于同一群。结果表明,本研究从分子流行病学角度证实了贵州省PEDV和porv流行与变异情况,为贵州省PEDV和porv合理的防控措施提供参考依据。

摘要：为研究能够同时检测PEDV、TGEV、porv三种猪病毒性腹泻病原的方法,分别设计三套特异性的引物和探针,建立了基于Taqman探针的三重Real-Time RT-PCR检测方法,实验结果表明,该方法特异性好,灵敏度高,检测最低浓度为10 copies/μL数量级.应用该方法对广东11个地市的44份猪腹泻样品进行检测,其中PEDV阳性率为100%,TGEV、porv阳性率为0,证明PEDV是引起广东地区猪病毒性腹泻的重要病原.