摘要：目的 :对石斛属植物亲缘关系进行分析 ,并设计一对能方便准确地鉴别铁皮石斛的特异性引物。方法 :用随机扩增多态性DNA(rapd)技术对石斛属内 2 6个种和金石斛属的 1个种进行了基因组DNA多态性分析 ,并构建聚类树状图。根据筛选到的DNA片段序列 ,将Sangon18引物从 3’端延长至 2 0bp ,得到所要的特异性引物。结果和结论 :设计成的特异性引物能方便快捷地鉴别出铁皮石斛。此技术为药材的分子鉴定提供了一个新思路。

摘要：为了能方便快捷地鉴别出铁皮石斛试管苗和铁皮石斛,采用随机扩增多态性DNA(rapd)技术对铁皮石斛试管苗及石斛属23个种进行了基因组DNA多态性分析,从中找出铁皮石斛试管苗特征性条带进行克隆和测序,并根据测序结果设计了特异性引物.采用此特异性引物对铁皮石斛试管苗及石斛属其他一些种进行扩增,结果表明,铁皮石斛试管苗与各地产野生铁皮石斛出现同一特征条带,而石斛属其他种未出现该条带.

摘要：共用 5 2 0个 10碱基随机引物对小麦抗条锈基因Yr5的近等基因系进行了rapd分析 ,发现了 3个特异性DNA片段S14 96 76 1 、S14 5 3880 、S14 181 950 与Yr5基因连锁 ,其中S14 96 76 1 与Yr5基因紧密连锁 ,遗传距离为 2 7cM。经对特异性DNA片段S14 96 76 1 进行克隆、测序 ,设计了PCR扩增用专化引物SC S14 96 76 1 a和SC S14 96 76 1 b ,用该引物可扩增出与原rapd引物扩增出的相似的特异DNA片段。由于该引物还可扩增出迁移率极为相近的另 1条非特异带 ,在琼脂糖凝胶上难以分辨 ,需用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合银染进行检测。经用F2 分离群体及部分相关品种材料检测 。

摘要：应用随机扩增的DNA多态性(rapd)技术可以快速简便获得雌雄异株植物雌雄株间的基因组差异信息,本文采用该技术对葎草雌雄混合基因池进行了扩增,在选用的100条10bp的随机引物中,引物S1519和S2142分别扩增出长度为1207bp和762bp的雄性连锁标记,对其进行回收克隆和测序后发现这两个片段富含AT序列,AT含量分别为64%、54.7%,经核苷酸数据库BLAST检索未发现其同源序列。根据测序结果设计的SCAR引物可以将这两个雄性连锁的rapd标记转化为稳定性和特异性更好的SCAR标记。

摘要：目的对福建省23个不同地理种源的南方红豆杉Taxus chinensis ***进行分析,以揭示其种源和种群的遗传多样性,为南方红豆杉资源的收集与保护提供一定的理论依据。方法利用rapd分子标记技术,对福建省23个不同地理种源的南方红豆杉的遗传多样性进行分析。结果物种水平上的观测等位基因数(Na)为1.974 4,有效等位基因数(N_e)为1.603 8,Nei’s基因多样性指数(H)为0.351 3,Shannon多样性指数(I)为0.522 8。不同种源的南方红豆杉的遗传多样性相对较高。通过对种源和种群的遗传多样性分析,发现23个不同种源的南方红豆杉的遗传距离变化幅度为0.240 4~0.912 0,遗传相似度的变化幅度为0.401 7~0.786 3。7个不同种群的南方红豆杉群体的遗传距离变化幅度为0.021 0~0.379 4,遗传相似度的变化幅度为0.684 3~0.979 2。根据Nei法计算南方红豆杉7个种群遗传多样性遗传相似度(D_(st))为0.108 8,分化指数(G_(st))为0.369 0,基因流系数(N_m)为0.855 0,总的遗传变异中有36.9%的变异存在于群体间,群体内的变异63.1%,种群内存在明显分化。结论不同种源间的南方红豆杉存在一定的遗传变异,但不同种群间的南方红豆杉群体的相似度又比较高,亲缘关系较近。

摘要：采用改良的CTAB法提取19个樱花品种的基因组DNA.利用rapd技术对19个樱花品种进行亲缘关系鉴定和品种分类研究.从60条10 bp随机引物中筛选出32条扩增效果较好的引物进行扩增,共扩增出533条带,其中多态性带为406条,多态率达76.17%.根据扩增结果进行UPGMA聚类分析,聚类结果将19个品种分为2大类群,第1类群主要为杂交樱系;第2类群为日本晚樱系,根据樱花的重瓣性、枝姿和花色又可分为不同的亚类群、类和亚类.结果表明应用rapd技术对樱花分子水平的分类结果与传统分类学的结果基本一致,进一步证明种源、重瓣性、枝姿和花色都可作为樱花品种分类的重要指标.

摘要：以改良CTAB法提取的荔枝基因组DNA为模板,应用L25(56)正交表,研究了Taq、Mg2+、随机引物、dNTPs和DNA模板5种rapd反应组分浓度变化对扩增结果的影响,量化分析结果表明:正交设计可以应用于rapd反应体系的建立。用这种方法建立的荔枝rapd-PCR优化反应体系为:25μL反应体系中含1×Buffer、2.0mmol/LMg2+、2.0UTaqDNA聚合酶、0.15mmol/LdNTPs、0.6μmol/L随机引物、25ngDNA模板。

摘要：目的探索金龙胆草DNA的提取并利用均匀设计方法对其rapd反应体系进行优化。方法比较改良SDS法和试剂盒提取法提取的DNA效果,通过电泳、紫外分光光度仪检测及rapd扩增效果确立适合实验操作的最佳方法;利用两次均匀设计实验确立最佳PCR反应体系,并考察退火温度对扩增效果的影响。结果改良SDS法较适合金龙胆草基因组DNA提取,25μL体系中内含10xTaq reaction Buffer 2μL、Mg2+2.5 mmol/L,dNTPs 4.5 mmol/L,Primer3.5μmol/L,DNA模板60 ng,Taq酶1.5 U,退火温度为38.9℃。结论改良SDS法及金龙胆草的rapd反应体系可以用于金龙胆草的DNA分析。

摘要：为寻找简单、可重复的分子鉴定方法,对绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum(Thunb.) Makino)新鲜品、药材干品及其混淆品乌蔹莓(Cayratia japonica(Thunb.) Gagnep)进行了鉴定。首先从2000余条10碱基的随机引物中筛选出20条,并以5条为1组随机分成4组,然后采用rapd方法对7份不同来源的绞股蓝新鲜品进行扩增,对扩增得到的绞股蓝特征条带进行基因克隆、测序,分析序列特征,再设计特异性引物,最后,用绞股蓝新鲜品、药材干品及其混淆品乌蔹莓等样品进行PCR验证。结果显示:rapd扩增能够得到7份绞股蓝新鲜品重复的共有特征条带;经基因克隆、测序并设计特异性引物后进行PCR验证,获得了绞股蓝特异序列扩增区域标志(Sequence-characterized amplified region maker,SCAR)。初步建立了区分绞股蓝及其混淆品乌蔹莓的分子鉴定标准,并首次将SCAR应用于绞股蓝分子鉴定中。

摘要：采用单因素设计和均匀设计对光皮桦的rapd反应体系进行了优化,并对2种设计方案优化出的最佳反应体系的可靠性和稳定性进行比较.结果表明:2种设计均可用于光皮桦rapd体系的优化,但单因素设计受多因素间交互作用的影响使反应体系达不到最优;而均匀设计能避免盲目性,并快速得到条带清晰、稳定性好的适合光皮桦的最优rapd体系.