摘要：以高粱细胞质雄性不育系和保持系 A1Tx6 2 3 A/B,A2 V4 A/B为材料 ,考察了 Mg2 + ,Taq酶 ,d NTP,引物 ,模板等的用量、循环参数及不同的 PCR仪对随机扩增多态性 DNA(rapd)反应的影响。结果发现 :在 2 5 μL体系中 ,Mg Cl2 2 .0 mmol/L,Taq酶 0 .75 U(1 U=1 μmol/min) ,d NTP0 .1 5mmol/L,引物 1 6 .5 ng,模板 3 0 ng,明胶 0 .0 0 1 % ,KCl5 0 mmol/L,Tris1 0 mmol/L(p H8.3 )为最佳反应混合物组合。对 Peltier Thermal Cycler 2 0 0而言 ,94℃预变性 5 min,94℃变性 1 min,3 5℃退火 1 min,72℃延伸 2 min,最后 72℃保温 5 min,共计 40个循环为最佳扩增条件 ;对 Perkin ElmerCetus DNA Thermal Cycler- 480而言 ,采用 94℃预变性 3 min后 ,前 3个循环 ,94℃变性 1 min,3 5℃退火 1 min,72℃延伸 2 min,后 3 7个循环 ,94℃变性 3 0 s,3 6℃退火 45 s,72℃延伸 1 min,最后72℃保温 5 min的循环程序可获得理想扩增。并阐述了优化 rapd实验体系的设计原则。

摘要：〔目的〕对凝固酶阴性葡萄球菌进行DNA分型并分析其多态性 ,为临床提供流行病学资料。〔方法〕用随机设计 10、17、18bp的三种引物 ,分别对实验菌株DNA做rapd。〔结果〕18bp的引物扩增的产物最理想 ,以其图谱的差异对临床分离株DNA分析后 ,2 0株区分为 5个型别。其中属Ⅰ型者含株数多 ,为 16 / 2 0占总数的 80 %。〔结论〕rapd技术能在DNA水平上对凝固酶阴性葡萄球菌分型 ,以其方法快捷、可靠、经济的优点可适用于该菌致医院感染源的追踪及流行病学研究。

摘要：目的 :利用rapd技术对 9个家猪群体的遗传多样性进行分析。方法 :采用rapd技术对 1 3/1 7罗伯逊易位纯合子猪、易位杂合子猪及正常核型猪的三个群体、丹系长白猪群体、加系双肌臀杜洛克猪群体、加系双肌臀大约克猪群体、加系双肌臀长白猪群体及欧洲猪与易位杂合子猪产生的两个杂交后备猪群体的遗传多样性进行分析 ,并分别计算其共有带率F及遗传距离指数D ,采用最小距离法绘制其树状聚类图。结果 :1 9条引物的扩增结果产生多态性 ,共得到 31 6条清晰稳定的多态型片段 ,片段长度在 2 0 0～ 4 0 0 0bp之间 ,由Nei的公式计算获得的遗传距离介于 0 0 1 6～ 0 0 92之间 ,参照系统进化树可将 9个品系划分为 3个组群。结论 :9个品系之间存在着明显的遗传差异 ,可作为进一步育种方案设计的依据。

摘要：采用BSA法 ,应用rapd技术筛选 5 0 0个随机引物 ,共扩增出 16 14条DNA谱带 ,其中有OPA 0 1、OPP 0 9、OPP 14、OPH 19、OPN 0 8、OPN 0 7、OPN 2 0、OPY 14、OPS 2 0、OPJ 0 6十个引物在抗感池间扩增出了多态性谱带。分析表明 ,132株后代中 ,OPN 0 772 7有 4株重组 ,OPN 0 83 73 有 8株重组 ,OPY 14 60 0 有 12株重组 ,重组率为 3 0 %、6 1%和 9 1% ,换算为图距单位为 3 2cM、6 5cM和 11 7cM。其中OPN 0 83 73 、OPN 0 772 7与抗蚜基因紧密连锁。将这两个引物扩增出的rapd片段回收、纯化、克隆、测序。结果表明 :两片段长分别为 72 7bp和 373bp。将这两个标记命名为OPN 0 772 7和OPN 0 83 73 。根据测序结果设计 2对特异性引物 ,进行特异性扩增 ,将rapd标记成功地转化为SCAR标记。同时构建了抗蚜基因的连锁群。

摘要：对ＲＡＰＤ标记检测作物种子纯度方法的应用基础进行了分析，认为应用该方法时，送检种子应按照《１９９３国际种子检验规程》中所规定的方法进行抽样，应建立在０．５—１小时内可以完成整个过程且ＤＮＡ质量较好，必须按照ＤＮＡ分子标记检测种子纯度的原理、实验设计进行。