摘要：水稻黑条矮缩病毒(Rice black-streaked dwarf virus,rbsdv)不同双链RNA片段的三价RNAi(RNA interference)表达载体在转基因水稻中的研究尚未见报道。本研究以rbsdv已报道不同双链RNA序列为基础,设计了针对S2、S6、S10三个基因共605 bp的RNAi靶序列,通过基因合成的方法获得相应的目的片段。利用Gateway~ LR Clonase^TM Ⅱ Enzyme Mix的LR反应将目的基因构建到RNAi载体pBDL03中,然后通过农杆菌转化法转到水稻品种泰粳394中。通过PCR和荧光验证共获得45株阳性苗。T1代植株rbsdv抗性鉴定结果证实针对S2、S6和S10基因的三价RNA沉默载体对rbsdv具有良好的抗性。本研究结果为利用RNAi技术进行植物抗病毒研究奠定了基础。