摘要：本研究针对副结核分支杆菌(MAP)F57基因特异性保守序列,设计rpa引物和nfo探针,建立了快速检测MAP的结合侧流层析试纸条的肉眼可视化rpa检测方法(rpa-lfs)。结果显示,所建立的rpa-lfs方法在金属浴中39℃恒温振荡反应20 min后,将产物加至侧流层析试纸条中,可在5 min内实现对检测结果的肉眼可视化判定;所建立的rpa-lfs方法特异性强,仅对MAP产生扩增,与其他常见可引起牛腹泻的病原均无交叉反应;以含有F57基因全长的重组质粒pTOPO-T-F57作为模板,rpa-lfs的检出限为12 copies。进一步应用rpa-lfs方法对57份牛腹泻临床样本进行MAP检测,检出9份阳性结果,与实时荧光PCR方法检测结果一致。本研究建立的副结核分支杆菌可视化rpa-lfs方法操作简单,反应快速,不依赖于复杂精准的仪器设备、专业技术人员和严格的实验室环境条件,为养殖场一线的MAP现场检测提供了一种新的解决方案。