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新月柄杆菌rsaa分泌系统用于大肠杆菌胞外递送重组蛋白的初步研究: 收藏
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引用; 《生物技术通讯》2008年第2期19卷 175-180页; 作者：宁亚蕾周立雄肖斌张卫军曾浩毛旭虎邹全明第三军医大学临床微生物及免疫学教研室暨重庆市生物制药工程技术研究中心重庆400038 重庆工学院生物工程学院重庆400050; 目的:构建基于新月柄杆菌rsaa外运机制的以大肠杆菌为宿主的原核胞外分泌表达载体系统。方法:利用分子克隆手段,按rsaa分泌系统操纵子组织方式,将rsaa系统外运功能基因配合以异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒。以绿色荧光蛋白(GFP)为报...; 目的:构建基于新月柄杆菌rsaa外运机制的以大肠杆菌为宿主的原核胞外分泌表达载体系统。方法:利用分子克隆手段,按rsaa分泌系统操纵子组织方式,将rsaa系统外运功能基因配合以异源调控序列克隆至pQE30骨架质粒。以绿色荧光蛋白(GFP)为报告分子、大肠杆菌M15为宿主菌,诱导表达后通过Western Blotting检测培养上清中GFP的表达。结果:获得了与设计完全一致的pQABPS载体,利用该载体系统,在培养上清中报告分子GFP的表达明显增加,且是通过特异的rsaa外运机制被分泌至胞外的,而非渗漏表达或简单的信号肽引导。结论:在大肠杆菌中重现了rsaa分泌系统的外运功能,为该系统在基因工程领域的应用研究打下了良好基础。; 来源：详细信息评论

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