摘要：目的:探讨VEGFsiRNA对肝癌smmc7721细胞株VEGF表达和增殖的抑制作用。方法:采用siRNA设计法则并用计算机辅助设计9条VEGFsiRNA序列,长度为19个核苷酸;体外构建9条VEGFsiRNA序列,通过脂质体介导转入肝癌smmc7721细胞株,培养72h,采用CCK8试验分析VEGFsiRNA(25nmol/L)对细胞增殖的抑制效果,用ELISA法检测培养液中VEGF蛋白水平,流式细胞仪检测细胞周期的改变。结果:VEGFsiRNA1-VEGFsiRNA9序列对肝癌细胞的增殖有明显抑制作用,与脂质体对照组和空白对照组相比均有显著差异(P<0·05);其中,VEGFsiR-NA2、VEGFsiRNA4、VEGFsiRNA6、VEGFsiRNA7、VEGFsiRNA8、VEGFsiRNA9对细胞增殖的抑制效果均强于反义寡核苷酸组。VEGFsiRNA1-VEGFsiRNA9序列均能下调肝癌细胞VEGF蛋白的表达水平,以VEGFsiRNA7和VEGFsiR-NA2的效果最强,抑制率分别为52·65%和50·43%。VEGFsiRNA将肝癌细胞阻滞在S期,但未引起细胞凋亡现象。结论:成功地设计和合成VEGFsiRNA。后者能有效地抑制肝癌细胞的增殖,降低VEGF蛋白的表达量。

摘要：目的:探讨乙酰肝素酶(Hpa)反义寡脱氧核苷酸对人肝癌细胞株Hpa mRNA和蛋白表达的影响。方法:设计合成互补于Hpa mRNA起始密码区的硫代反义寡脱氧核苷酸AS-ODN及相应的无义对照寡脱氧核苷酸NS-ODN,以阳离子脂质体Oligofectamine^(TM) Reagent包埋后转染smmc-7721、BEL-7402细胞,以RT-PCR和Western-blot检测转染前后细胞Hpa mRNA以及蛋白表达的变化。结果:与正常对照组和NS-ODN相应浓度组相比,转染AS-ODN组肝癌细胞Hp amRNA和蛋白的表达均下降。结论:Hpa反义寡脱氧核苷酸下调Hpa mRNA和蛋白的表达,可能抑制肝癌的侵袭转移。