摘要：为了研究sry基因和Y染色体上微卫星标记对性别鉴定的影响,试验以哺乳动物为研究对象,采用多重PCR技术扩增绵羊和牛基因组中Y染色体上的2个微卫星标记和sry基因,根据其基因型进行性别鉴定,试图通过一次DNA扩增同时提供性别鉴定和基因分型的信息。结果表明:所设计的sry基因引物具有高度特异性,是性别鉴定的主要依据;Y染色体上的MCM158、MAF45两标记由于特异性不好而不适用于性别鉴定。

摘要：哺乳动物Y染色体短臂上的sry基因决定雄性发育方向。本研究参照哺乳动物sry基因保守区序列设计引物 ,以非性别特异性的线粒体DNA细胞色素b基因作为阳性对照 ,用PCR扩增江豚、长喙真海豚等鲸类动物的sry基因片断并对其进行凝胶电泳分析来鉴定鲸类动物的性别。通过此方法对 87个已知性别鲸类动物标本的检验 ,结果完全正确 ,并进一步应用此方法成功地完成了另外 33个未知性别鲸类标本的性别鉴定。由此建立了一套简单、快速。

摘要：以反刍动物为研究对象,应用多重PCR技术扩增绵羊基因组中X、Y染色体上的4个微卫星标记和sry基因,根据基因型进行性别鉴定,试图通过一次DNA扩增同时提供性别鉴定和基因分型的信息。结果表明所设计sry基因的引物具有高度特异性,是性别鉴定的主要依据,而Y染色体上的MCM158、MAF45两标记由于特异性不好,因此不适用于性别鉴定,对于X染色体上所选的两标记MILVET09和AE25只能进一步验证所鉴定的雄性个体。得出结论在被检个体中,能同时扩增出sry基因、MCM158、MAF45,X染色体上MILVET09和AE25,且X染色体上的MILVET09、AE25基因型为纯合子的个体为正常的雄性;被检个体中只有Y染色体上MCM158、MAF45和X染色体上MILVET09、AE25的扩增产物,而没有sry基因的扩增产物,则被检个体为雌性,且MILVET09、AE25的基因型对雌性个体的性别判断无影响。MCM158、MAF45两标记基因型不影响个体的性别鉴定结果。

摘要：根据荷斯坦牛sry基因设计一对引物,采用聚合酶链式反应(PCR)技术,以中国沼泽型水牛(Swamp Buffalo)基因组DNA为模板,扩增得到sry(Sex deterimation region of Y chromosome)全序列约2005bp,其中1-504bp为5’启动子区,1196-2005bp为3’侧翼序列,在505-1195bp为sry的外显子,编码229个氨基酸。在sry HMG-box区域设计探针,用地高辛标记后分别与雄性、雌性水牛基因组DNA进行Southern杂交,结果显示该段序列只在雄性DNA样本中有杂交信号,证明sry基因为雄性特异。BLAST比对结果显示与牛属动物sry基因的同源性为96％,其中sry基因HMG box区域同源性高达99％,说明sry基因具有高度的进化保守性。

摘要：为了探索和建立奶山羊胎儿成纤维细胞体外分离培养及性别鉴定的技术方法,获得转基因克隆羊的供体细胞,本试验用组织块培养法分离纯化得到两株奶山羊胎儿成纤维细胞系,进行细胞形态观察、生长曲线及细胞周期和倍性分析。同时根据GenBank上发布的山羊sry基因设计合成一对PCR引物作为性别鉴定引物,另外根据山羊BLG基因序列设计一对引物作为内参引物,建立PCR反应体系对两株胎儿成纤维细胞系进行性别鉴定。结果表明,分离的胎儿成纤维细胞活力良好,可在体外快速生长、增殖、稳定培养;阳性对照和山羊胎儿成纤维细胞系2经PCR扩增得到337 bp片段和498 bp的BLG基因片段,而阴性对照和山羊胎儿成纤维细胞系1经PCR扩增得到498 bp的β-乳球蛋白基因片段。将337 bp片段和pMD19-T载体连接,构建重组载体psry,通过测序证明337 bp片段为sry基因片段。这说明有337 bp扩增带的细胞系为雄性,无337 bp扩增带的细胞系为雌性。本试验为转基因奶山羊新品种的培育奠定了基础。

摘要：【目的】克隆内蒙古绒山羊sry基因的HMG-box区,并对其序列特征进行分析。【方法】参考Gen-Bank中山羊sry基因序列设计1对引物,采用PCR法扩增内蒙古绒山羊雄性个体的sry基因HMG-box区全部序列,克隆到pMD18-T载体中,转化DH5α菌,蓝白斑筛选阳性克隆,并进行测序。将测序结果与GenBank中部分偶蹄目动物sry基因HMG-box的序列进行同源性比较,构建系统进化树。【结果】内蒙古绒山羊sry基因HMG-box长度为231 bp,编码77个氨基酸;内蒙古绒山羊sry基因HMG-box与GenBank中山羊、绵羊、猪、麝香鹿、梅花鹿、牛、水牛和牦牛等偶蹄目动物的核苷酸同源性分别为100.0%,99.1%,86.1%,96.1%,96.1%,97.4%,95.6%和96.9%,推导的氨基酸序列同源性分别为100.0%,100.0%,83.1%,94.8%,94.8%,94.8%,92.2%和93.5%。基于sry基因HMG-box核苷酸序列构建的物种间系统进化结果,基本上与这些偶蹄目动物传统的系统分类结果一致。【结论】sry基因HMG-box区在物种进化中高度保守,有望作为构建系统发育树的候选基因。

摘要：利用赤麂sry基因序列设计引物,通过PCR反应分别扩增出毛冠鹿、黑麂、小麂的sry序列,并测得630 bp的碱基序列。麂属动物之间的序列差异为0.79%-1.90%,毛冠鹿属与麂属之间的序列差异为3.02%-3.97%。以牛sry为外源,用NJ法和MP法进行毛冠鹿和麂属3种动物分子系统进化树的构建与分析,结果表明：麂属3种动物之间的分歧时间为79万-190万年,毛冠鹿与麂属动物间的分歧时间为302万-397万年,梅花鹿与麂属动物的分歧时间为349万-460万年。

摘要：依据牛Y染色体上sry基因的特异序列设计、合成2对内外引物,从妊娠奶牛血浆中提取胎儿游离DNA,富集、浓缩后进行特异性巢式PCR扩增以鉴定奶牛早期胚胎的性别。结果表明,巢式PCR扩增sry基因对不同发育阶段奶牛胚胎性别鉴定的平均准确率为80%,其中1～2月龄、2～3月龄、4～8月龄的性别鉴定准确率分别为60%、85.7%、92.3%。试验证明该方法可行,准确率较高。

摘要：应用流式细胞仪分离赤麂的1,Y_1,Y_2染色体,通过简并寡核苷酸引物聚合酶链式反应(DOP-PCR)增加模板数量.用人的性别决定基因HMG框内设计1对引物进行PCR扩增.在雄性赤麂Y_2染色体DOP-PCR产物中扩增出与人sry基因同源的sry基因片段,经克隆测序后,初步证明赤麂Y_2染色体是真正的Y染色体,同时对赤麂sry基因进行了初步定位.

摘要：根据GenBank中山羊sry基因序列设计一对引物,采用PCR在雄性辽宁绒山羊个体中扩增出了包含sry基因整个编码区的特异片段,将特异PCR产物克隆到pMD18-T载体中,转化DH5α菌,筛选出sry基因的阳性克隆,进行了测序,将其序列与GenBank中部分偶蹄目动物的sry基因序列进行同源性比较,用NJ法构建了系统进化树。结果表明,辽宁绒山羊sry基因编码区长度为723 bp,共编码240个氨基酸,其中包含长度为231 bp的HMG-box,位于编码区的第190至420位核苷酸之间,编码77个氨基酸(H64-A140)。辽宁绒山羊sry基因编码区序列与GenBank中山羊、绵羊、牛、牦牛、水牛、梅花鹿、麝香鹿及猪等偶蹄目动物的同源性分别为100%,97.09%,89.21%,89.21%,88.38%,87.55%,86.16%和68.04%;基于sry基因编码区的核苷酸序列,构建的物种间系统树结果基本上与这些偶蹄目动物的传统系统分类相一致。