摘要：目的:鉴于高通量筛选方法是发现sirtuin调节剂的重要手段,拟通过组蛋白去乙酰化酶SIRT5去琥珀酰化酶活的最新发现,开发出SIRT5酶活的"直接荧光测定法",并探讨其在筛选SIRT5特异型抑制剂方面的应用。方法:设计、合成了带有香豆素荧光基团的琥珀酰多肽底物,通过条件优化,我们建立了SIRT5调节剂的荧光筛选方法,再结合SIRT1/2/3活性的二次筛选,可以发现SIRT5的特异型调节剂。结果与结论:建立了SIRT5调节剂的荧光筛选方法,为最终SIRT5靶向治疗的药物发现奠定基础。

摘要：sirtuin蛋白是一类称为依赖烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）的组蛋白去乙酰化酶,共有7个成员,均是潜在的疾病治疗靶点。然而,目前的荧光筛选方法,只适用于SIRT1~SIRT3。因此,根据SIRT5的新酶活,设计、合成了针对SIRT5的荧光标记多肽（ISGASE（Su K）-AMC）,并通过LC-MS和荧光检测证明了该荧光标记多肽能应用于SIRT5的活性筛选。