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口蹄疫3D蛋白N端t细胞表位重组蛋白的表达、纯化及鉴定: 收藏
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引用; 《河南农业科学》2012年第9期41卷 133-137页; 作者：卢清侠王世红金前跃李清州郝慧芳张改平河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室/河南省动物免疫学重点实验室河南郑州450002 河南省农业科学院农业经济与信息研究中心河南郑州450002; 为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端t细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pEt-28a中,构建原核表达质粒pEt28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPt...; 为获得具有抗原性的口蹄疫病毒(FMDV)3D蛋白N端t细胞表位的重组表达蛋白,根据FMDV3D蛋白前115位氨基酸序列,设计优化并人工合成相应的核酸序列,将其克隆至pEt-28a中,构建原核表达质粒pEt28a-115,并将重组质粒转化至BL21(DE3)细胞。经IPtG诱导后,收集菌液进行SDS-PAGE和Western-bolt鉴定,结果显示,在16kD处有一条明显的蛋白表达条带。对表达产物进行可溶性分析,结果表达蛋白50%为可溶性蛋白,经Ni-NtA亲和层析纯化后获得了较高浓度和纯度的目的蛋白。研究结果表明,含FMDV 3D蛋白前115位氨基酸的重组蛋白在大肠杆菌中得到了高效可溶性表达,并具有较好的抗原活性,为开发口蹄疫诊断试剂和基因工程疫苗奠定了基础。; 来源：详细信息评论

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