摘要：转录激活子样效应因子核酸酶(talens)已用于基因组编辑,而tale转录激活因子(tale-TFs)可用于内源基因的调控。通过修饰的tale蛋白与内源基因的启动子特异性结合来激活或抑制基因的表达。但是,对于截短了n端的tale是否会影响talens的效率还不确定。本文设计了不同长度n端的talens哺乳动物及酵母表达载体,对应哺乳动物绿色荧光报告载体及酵母报告载体。分别在哺乳动物细胞和酵母细胞上对不同长度n端talens的活性进行了检测。检测结果发现,含120个氨基酸n端的talen在酵母AH109细胞中的活性最高,n端长度为153个氨基酸的talens在293T细胞中表现最高的活性,但n端长度为153、140和160个氨基酸的talens的活性差异不显著(P>0.05)。随后,将结构优化了的tale-TF用于小鼠胎儿成纤维细胞中激活Oct4基因。相对阴性对照组,tale-TF将Oct4基因表达量上调了418倍。本研究结果表明,在哺乳动物细胞和酵母细胞中,具有最高活性talens的n端长度是不同的。本研究用结构优化的tale-TF诱导内源基因高水平的表达,为从体细胞中获得iP S细胞提供了研究策略。