摘要：目的:构建蜱传脑炎病毒tbe-e-d3抗原的融合蛋白原核表达质粒GSTpeT-30a(+)/tbe-e-d3,在大肠杆菌中诱导表达并用亲和层析法纯化,以获得特异性诊断抗原。方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因克隆技术构建重组质粒,转入大肠杆菌dH5α后经酶切鉴定,将测序正确的重组质粒转入大肠杆菌BL21(de3),IPTG诱导表达后进行亲和层析法纯化,SdS-PAGe分析其表达情况和纯度,间接eLISA法鉴定重组蛋白的特异性和灵敏度。结果:tbe-e-d3基因目的片段以正确的读框插入载体GSTpeT-30a(+),通过IPTG诱导在大肠杆菌中正确表达,亲和纯化得到较高纯度的蛋白质;间接eLISA法证明抗原特异性和灵敏度良好,送检的15份阳性患者血清样本中检出10份阳性结果,40份健康人血清样本中检出1份假阳性结果。结论:获得的His-tbe-e-d3融合蛋白具有良好的抗原性,可作为森林脑炎病毒特异性血清学诊断的备选抗原之一。