摘要：目的:构建tgfβ1基因RNAi慢病毒载体。方法:根据人tgfβ1的mRNA序列选择3个靶序列并根据它们设计合成3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列;将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pRNA-U6/Lenti质粒,酶切和测序鉴定后,将以上质粒分别和包装质粒混合物共转染293FT细胞,包装产生病毒颗粒。各组病毒载体转染Hela细胞后,运用Real-Time PCR和ELISA检测tgfβ1mRNA和蛋白的表达水平。结果:酶切和测序证实目的寡核苷酸片段已被准确克隆到pRNA-U6/Lenti质粒;各质粒与包装质粒共转染293FT细胞后能产生高滴度的慢病毒载体颗粒;各组慢病毒载体感染Hela细胞后,有两组可以显著抑制tgfβ1mRNA水平及蛋白水平的表达,其中以第一组效果最佳。结论:成功构建了人tgfβ1基因RNAi慢病毒载体。

摘要：肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)是1997年McPherron等[1]根据tgf-β超家族的保守区设计一对简并引物,通过PCR扩增而发现的骨骼肌特异性因子,属于转化生长因子(transforming growth factor beta,tgf-β)超家族成员之一,又名生长分化因子8(growth and differentiation factor8,GDF-8).