摘要：【目的】为探明荔波瑶山鸡tgfβ3基因与繁殖性状的关系,寻找可作为鸡繁殖性状的遗传标记。【方法】针对tgfβ3基因设计6对引物,采用PCR测序法筛选多态位点,并利用荔波瑶山鸡母系60个个体进行繁殖性状的关联分析。【结果】荔波瑶山鸡tgfβ3基因有17个多态位点,tgfβ3基因53(T→C)、1653(C→T)和1755(A→G)位点各300日龄产蛋量、首次就巢日龄、首次就巢持续时间、首次就巢至重新开产间隔和300日龄就巢次数间呈显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01);3343(C→T)与首次就巢持续时间、首次就巢至重新开产间隔和300日龄就巢次数均呈显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01);3540(C→T)与开产日龄、300日龄产蛋量和首次就巢持续时间均呈显著或极显著相关(P<0.05或P<0.01);4786(C→T)和7471(G→A)分别与300日龄产蛋量和首次就巢日龄均呈显著相关(P<0.05);7263(C→T)与首次就巢持续时间呈显著相关(P<0.05)。【结论】tgfβ3基因53(T→C)、1653(C→T)、1755(A→G)、3343(C→T)、3540(C→T)、4786(C→T)、7263(C→T)和7471(G→A)与就巢性状关联显著,可作为降低就巢性提高繁殖力的辅助选择标记。

摘要：目的探讨在胚鼠腭突培养细胞中应用StealthTM RNAi转染有效沉默转化生长因子β3(tgfβ3)基因的可行性。方法采用Bal b/c近交系小鼠在交配后第14天取胚鼠腭突,离散后进行细胞培养,应用相差显微、MTT法观察传代细胞的形态和生物学特性。采用化学合成的StealthTM RNAi抑制原代胚鼠腭突上皮细胞和间充质细胞内源性tgfβ3mRNA表达,检测作用24、48、72h后,tgfβ3、Smad2、BMP2三种基因的表达情况。结果经过本实验设计的StealthTM RNAi干扰的胚鼠腭突培养细胞中,tgfβ3基因的mRNA和蛋白表达明显降低,但沉默效果随时间有减弱趋势。Smad2基因的mRNA和蛋白表达均随着tgfβ3基因的沉默而减低;但BMP2基因的表达无显著性的改变。结论 StealthTM RNAi能有效地沉默tgfβ3基因,并下调Smad2基因的表达,但对BMP2基因表达无明确影响。