摘要：目的:建立一套快速、灵敏、高效的怀地黄tmv检测技术,为怀地黄tmv的脱毒检测提供技术支持,以实现怀地黄脱毒苗的产业化生产,改善病毒病引起的品种退化现象。方法:根据GenBank上登录的tmv外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术检测怀地黄中的tmv,并对PCR扩增产物进行测序。结果:利用IC-RT-PCR技术扩增出了预期目的条带,其扩增产物与地黄tmv CP基因(登录号为AY555269)核苷酸序列的同源性达95.29%,氨基酸同源性达96.7%。结论:建立了怀地黄tmv的IC-RT-PCR检测技术,集免疫学与分子生物学检测技术于一体,灵敏度高,操作简便,适合于怀地黄tmv的快速检测。

摘要：为创制双抗黑胫病(0号生理小种)和普通花叶病(tmv)的烟草种质,采用母本来源单倍体技术将Coker371和Coker176杂交后代F_1与烟属野生种非洲烟草(N. africana)杂交,经形态观察,结合流式细胞仪倍性鉴别,获得了母本来源的单倍体苗,并对分子标记辅助选择获得的目标单倍体进行叶脉培养加倍,创制了双抗黑胫病及tmv烤烟新种质RBST(Resistant to black shank and tmv)。苗期人工接种抗病鉴定、分子标记辅助检测和田间农艺性状鉴定表明,RBST的抗病性和农艺性状稳定,可用作烟草品种抗性定向改良的抗源材料。

摘要：采用ELISA-DSM法和半叶枯斑法,测定了壳寡糖(50μg/mL)诱导后普通烟(Nicotiana tabacum)植株体内tmv浓度的变化.ELISA-DSM测定显示,在接种后10 d,仅在接种叶的上位叶和新生叶片中检测到病毒,且病毒浓度仅为不诱导对照的52.7%和38.8%,在下位叶中未检测到病毒;同时,接种叶内病毒增殖严重受抑,接种后10 d,病毒浓度仅为不诱导对照的23.52%.半叶枯斑法检测获得了相同结果,以壳寡糖处理植株的不同叶位的叶片为毒源,产生的枯斑数目都大幅度低于不诱导对照.以上结果证明,壳寡糖处理后tmv的上行和下行长距离移动均明显延迟和减少,下行移动受到的影响更大.透射电镜检查发现,处理植株接种叶的下位叶片韧皮部细胞中没有病毒晶体和病毒粒子,在上位叶片筛管伴胞中仅见少量病毒粒子,两者都未发现任何诱导新生物,也未见其他细胞结构变化.结果表明,壳寡糖处理使烟草对tmv病毒侵染产生了诱导抗病性,系统侵染症状明显减弱;壳寡糖处理对病毒长距离移动的不利影响可能是接种叶片病毒增殖减少所造成的.

摘要：为更好地利用抗tmv烤烟种质资源,提高烤烟抗tmv育种效率,对烤烟品系CV87、FC8、抗88的tmv抗性遗传规律及抗性来源进行了研究。利用抗病烤烟品系CV87、FC8、抗88分别与感病品种云烟87、中烟100配置杂交组合,构建F1、F2群体,并利用tmv-C菌株进行抗性鉴定;同时,设计N基因引物对参试烤烟品种(系)的基因组DNA进行PCR扩增。经抗性鉴定,CV87、FC8、抗88及F1群体对tmv免疫,云烟87、中烟100感tmv,卡方(χ2)检验证明F2群体抗感分离比为3∶1,符合显性单基因遗传;PCR结果表明,抗病品系CV87、FC8、抗88基因组内存在N基因序列,感病品种云烟87、中烟100基因组内未发现。本研究表明,CV87、FC8、抗88烤烟品系的tmv抗性来源于N基因。

摘要：为有效鉴定烟草的主要病毒,包括烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,tmv)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)和烟草脉带花叶病毒(Tobacco vein banding mosaic virus,TVBMV),建立了一种同时检测这4种病毒的多重RT-PCR检测方法。通过人工接种4种病毒试验,发现TVBMV在混合侵染中受tmv、CMV和PVY的拮抗作用。为提高4种病毒复合侵染下TVBMV的检测灵敏度,筛选出TVBMV中表达水平最高的PIPO基因,利用该基因结合tmv、CMV和PVY的CP基因,基于保守区域设计引物,并优化引物及模板的浓度,在一个PCR反应体系中稳定扩增获得大小分别为700、452、275和235 bp的产物。该方法实现了对多种病毒的同时检测,适用于目前大部分烟区田间病毒复合侵染的监控。

摘要：根据烟草花叶病毒(tmv)复制酶蛋白和黄瓜花叶病毒(CMV)的外壳蛋白基因序列设计、合成引物,以感病组织和健康组织总RNA为模板,进行多重PCR反应。可以扩增出1.44 kb带和735 bp带,与预期结果完全一致。而健康对照则无任何扩增条带出现。对2005年从广东采集的18份检测样品进行检测,检测出tmv、CMV复合侵染的样本占总样品的44.44%。

摘要：对不同遗传类型的 7个烟草品种设计水杨酸 (SA)预处理与对照 ,而后进行tmv接种和挑战接种 ,调查这些品种的响应程度。发现对tmv侵染的响应可分为花叶和枯斑反应 2种类型。在两个对tmv侵染具有系统获得抗病性 (SAR)特性的烟草品种中 ,品种HZNH在病斑数量、形态及大小等方面与前人已沿用多年的品种Xanthi nc存在明显差异 。

摘要：广西烤烟生产因受到普通花叶病毒(tmv)感染的影响,产量和品质均遭受严重损失。为了掌握广西烟区tmv的多样性,解释其发生规律,本研究在广西壮族自治区贺州市、百色市和河池市的8个地点收集了17个仅感染tmv的烟叶样品。经过总RNA提取和逆转录得到对应的cDNA,针对tmv外壳蛋白区域设计了1对引物,经PCR扩增获得广西烟区17个tmv样品的外壳蛋白完整序列。基于tmv外壳蛋白核苷酸序列的系统发育分析结果表明,广西烟区的tmv存在着不同于我国其他地区的独特类群,在广西不同地区之间,贺州的tmv具有很近的亲缘性,来源相对单一,而百色的tmv则具有很高的多样性,体现了tmv传播途径的差异。研究结果可为广西烟区不同地区tmv的绿色防控提供参考。

摘要：采用盆栽试验法,随机完全区组设计,开展了DMP用量、土壤质地和水分对烟株生长和抗tmv活性的交互作用研究.结果表明,DMP用量×土壤质地、DMP用量×水分、DMP用量×土壤质地×水分对烟株生长和抗tmv活性的交互作用显著;土壤质地×水分对烟株抗tmv活性的交互作用显著,但对烟株生长的交互作用不显著.7 d浇水1次时,砂土中DMP用量为1.5 g/株的烟株生长发育和抗tmv能力最好;壤土中用量为1.5 g/株的烟株生长发育最好,用量为1.0 g/株的烟株抗tmv能力最好.14 d浇水1次时,砂土中DMP用量为1.0 g/株的烟株生长发育和抗tmv能力最好;壤土中用量为0.5 g/株的烟株生长发育最好,而用量为1.5 g/株的烟株抗tmv能力最好.通过研究掌握了DMP用量、土壤质地和水分对烟株生长和抗tmv活性的交互作用关系,获得了砂土和壤土中两种浇水频率下DMP的最佳用量参数,可为生产上合理应用提供科学参考.

摘要：英国tmv公司研制出一种4×4型侦察车，该车是其6×6型特种部队侦察车的变型车，仍保留了6X6型车的众多设计特点，其中包括开放式车架、双V型车体。