摘要：根据taura综合征病毒(TSV)基因组,设计特异性引物,从感染病毒组织中提取组织总RNA后扩增,分别将3个主要结构蛋白基因VP1、VP2和VP3克隆到pGEM TEasyVector.与表达载体连接后,导入大肠杆菌中诱导表达,并纯化目的蛋白.诱导表达的融合蛋白分子量分别为54.2×103、43×103和57.1×103,在变性条件下过柱纯化VP1和VP2,一次可以纯化10mg以上纯度较高的蛋白.

摘要：设计了一对能扩增大小为231bp对虾taura综合征病毒 (TSV)某段基因的特异性引物 ,优化建立了能快速检测TSV的二温式RT-PCR。特异性和敏感性试验结果表明 ,二温式RT-PCR能对3个试验用TSV毒株的RNA进行扩增 ,并得到与预期大小一致的231bp的扩增产物 ,而其它3种对虾病原则无相同大小的特异性扩增产物出现 ;RT-PCR最低能检测到1pg的TSVRNA。应用RT-PCR对320份分别来自广西沿海不同对虾养殖场的对虾样品进行检测 ,结果一共有85份检出TSV。这说明了TSV在广西沿海地区养殖对虾中已呈现出区域性流行趋势 ,同时也显示了RT-PCR在TSV临床检测中具有较高的实用性。

摘要：目的:建立桃拉综合征病毒快速荧光定量RT-PCR用于提高我市对虾出口检验检疫工作效率和疫病防控。方法:选取TSV基因组的保守序列,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,扩增产物长度为73 bp。构建TSV目的扩增片段的质粒为标准品,对TSV的核酸提取、RT-PCR进行优化。结果:TSV核酸提取20 min、RT-PCR34 min,检测灵敏度为0.03 fg/μl,组内的实验变异系数为0.25%～1.17%、组间实验变异系数为1.51%～2.60%,与10种病原微生物无非特异反应,定量标准曲线相关系数=-1。结论:本方法用于TSV核酸定量检测速度极快,灵敏度与特异度高、重复性好、定量准确,各项指标均优于标准方法。

摘要：taura综合征病毒是世界动物卫生组织(OIE)目录规定的水生动物二类疫病病原体。在对上海口岸进境的鲜活虾产品TSV疫情监测过程中,通过改进样品RNA抽提方法及设计新的PCR引物,提高了TSV的阳性检出率。