摘要：一、材料与方穈　　1.c-myc寡核苷酸的设计、合成:根据c-myc cDNA序列AUG后的15个碱基,设计出相应的正义(SON)、反义(ASON)和错配寡核苷酸.正义5'ATGCCCCTCAACGTG3'反义5'CACGTTGAGGGGCAT3',错配5'CACGGTGAGGTGCAT3'(15对碱基全硫代修饰)。

摘要：目的探讨反义寡核苷酸(ASODN)抑制甲状腺癌细胞血管内皮生长因子(vegf)表达及内皮细胞生长的效应。方法设计合成靶向vegf的ASODN转染人髓状甲状腺癌细胞系(TT)细胞,并制备相应条件培养基作用内皮细胞ECV304,设正义寡核苷酸(SODN)和空白对照组进行比较。观察细胞生长状态,RT PCR、免疫细胞化学法检测TT细胞vegfmRNA和蛋白表达,四氮唑蓝法检测TT和ECV304细胞生长抑制率(IR),流式细胞仪、吖啶橙/溴化乙锭染色法检测ECV304细胞凋亡状态。结果ASODN组TT细胞vegfmRNA和蛋白表达显著低于SODN和对照组(P0.05);各转染组ECV304细胞IR差异亦无统计学意义(P>0.05);而经各ASODN组TT细胞条件培养基作用的ECV304细胞生长明显受抑,IR(分别为0.21±0.03、0.31±0.01、0.42±0.22)显著高于SODN组(0.05±0.03,P<0.01),并伴明显细胞凋亡,上述效应呈浓度依赖性。结论ASODN可通过特异性封闭甲状腺癌细胞vegf表达,抑制内皮细胞生长,干扰肿瘤血管生成。

摘要：RNA干扰已成为当前肿瘤基因治疗的新策略，我们设计了针对血管内皮生长因子（vegf）短发夹RNA（shRNA），观察其对人胃癌细胞血管vegf表达的影响。