摘要：为获得传染性法氏囊病病毒(IBDV)特异性抗体检测用抗原vp2、vp1及vp2-vp1蛋白,分别设计引物扩增IBDV野毒株NN1172的vp2和vp1基因,并扩增vp2和vp1基因中抗原性和亲水性较好的重要区域,通过PCR扩增基因串联方法对截短的vp2和截短的vp1基因进行串联,首次获得vp2-vp1串联基因,并对vp2、vp1和vp2-vp1串联基因进行了原核表达和鉴定。结果成功构建了原核表达载体pET-vp2、pET-vp1和pET-vp2-vp1;诱导表达条件显示,3个重组质粒分别转入BL21菌株后经0.05 mmol/L IPTG诱导表达,分别得到分子量为69、114和63 kDa的vp2、vp1和vp2-vp1重组蛋白,且均以包涵体形式表达,3个重组蛋白分别于诱导后5、3和6 h时表达量最多。Western blot结果显示,表达的vp2、vp1和vp2-vp1蛋白与鸡抗IBDV阳性血清均具有良好的反应原性。以纯化的vp2、vp1和vp2-vp1蛋白作为包被抗原对传染性支气管炎病毒(IBV)、呼肠孤病毒(ReoV)、禽白血病病毒(ALV)和新城疫病毒(NDV)4种阳性血清检测均为阴性,表明所获得的纯化蛋白具有高度的特异性;对免疫了IBD灭活疫苗,IBD基因工程疫苗和IBD弱毒疫苗的商业鸡群进行抗体检测,结果均能显示疫苗免疫后机体抗体水平的变化趋势。本研究表明利用该原核表达系统所表达的3个蛋白均具有良好的免疫反应活性,为IBDV特异性抗体的检测和新型亚单位疫苗的研发奠定基础。