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HBV x区基因部分序列的亚克隆与PCR检测: 收藏
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引用; 《现代生物医学进展》2006年第8期6卷 4-6,9页; 作者：袁媛陈强杨继红熊国梅刘中来华中师范大学生命科学学院武汉430079; 目的:探讨HBV x区基因用于乙型病毒性肝炎早期诊断价值和意义。方法:设计特异性引物,将pBR322-HBV质粒x区部分序列PCR产物AT亚克隆至pBS-T载体,提取和纯化质粒DNA,再对HBV x区序列进行PCR扩增。结果:获得了预期希望的质粒。PCR的最佳退...; 目的:探讨HBV x区基因用于乙型病毒性肝炎早期诊断价值和意义。方法:设计特异性引物,将pBR322-HBV质粒x区部分序列PCR产物AT亚克隆至pBS-T载体,提取和纯化质粒DNA,再对HBV x区序列进行PCR扩增。结果:获得了预期希望的质粒。PCR的最佳退火温度为51℃,灵敏度达到101拷贝/2μl,线性范围101-1010拷贝/2μl。讨论:pBR322-HBV质粒中的靶基因成功地被亚克隆至pBS-T载体。pBR322-HBV中x区目的序列扩增产物为57bp,该小片段勿需纯化就可直接AT亚克隆至新载体,有利于后续的常规PCR检测和TaqMan MGB荧光定量PCR检测。; 来源：详细信息评论

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