摘要：目的：用band3基因的反义 mRNA探针进行斑马鱼全胚胎原位杂交，检测 band3基因在野生型Tüebingen斑马鱼胚胎发育过程中的表达。方法：Trizol法提取斑马鱼胚胎总RNA并设计特异性引物，采用RT-PCR法扩增band3基因cDNA编码区片段；通过基因重组技术构建PBSK-band3重组质粒，用BamHⅠ酶切得到线性化PBSK-band3；以T7 RNA聚合酶转录合成反义地高辛标记的band3 RNA探针，用全胚胎原位杂交法检测band3基因在斑马鱼胚胎早期的表达情况。结果：成功克隆band3基因片段，构建PBSK-band3重组质粒；经体外转录获得地高辛标记的反义band3 mRNA探针，原位杂交后检测证实band3基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中间细胞群（ICM）和主动脉性腺中肾区（AGM）呈现高表达。结论：地高辛标记的反义band3 mRNA探针可检测到斑马鱼胚胎中band3基因的定位表达。