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一株西尼罗病毒基因组cdna亚克隆的构建与鉴定: 收藏
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引用; 《军事医学科学院院刊》2005年第5期29卷 424-428页; 作者：李晓峰姜涛陈水平秦成峰于曼秦鄂德军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071; 目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cdna的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cdna克隆奠定基础。方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及O ligo6软件设计5对引物。以感染...; 目的:构建我室保存的一株西尼罗病毒引进毒株(CH-01)基因组全长cdna的亚克隆,为进一步构建该毒株的感染性全长cdna克隆奠定基础。方法:根据CH-01病毒株基因组序列中含有的特异性酶切位点,利用DNAstar及O ligo6软件设计5对引物。以感染细胞中的病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出覆盖病毒基因组全长的5个cdna片段,并分别将其克隆至pGEM-T easy载体,通过片段间共有的酶切位点进行连接,最终获得基因组5′和3′半分子,并分别通过序列测定加以鉴定。结果与结论:已构建出西尼罗病毒CH-01株基因组的5′和3′半分子,经酶切鉴定和序列测定表明所获得的cdna克隆为该株病毒的特异性序列。; 来源：详细信息评论

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