摘要：基于环境DNA(edna)技术的鱼类多样性监测方法因具有灵敏度高、对目标生物无伤害以及成本低等特点,近年来在国内外得到了广泛应用。edna方法的有效性往往取决于宏条形码引物的选择,尽管目前已经有一些鱼类环境DNA宏条形码引物,但较少有研究综合评估这些引物的检出效果。本研究评估了来自COI、Cytb、12S rRNA和16S rRNA基因的29对鱼类e DNA宏条形码引物(包括本研究设计的2对和从国内外文献中引用的27对引物),首先基于计算机模拟PCR(in silico PCR)进行了初步分析,随后通过高通量测序对其中效果较好的17对引物开展了更进一步的验证,结果显示:计算机模拟PCR结果良好的引物在进行高通量测序时并非全部表现良好,表明引物的筛选不能仅仅依靠计算机模拟PCR;具有更长扩增片段长度的宏条形码引物并没有获得理想中更好的扩增效果,表现效果好的引物大多是扩增片段长度处于200~300 bp之间的引物;相对于COI和Cytb而言,12S rRNA引物与16S rRNA引物均具有良好的扩增效果,适宜作为鱼类环境DNA宏条形码而用于鱼类多样性研究;同时,鉴于当前的鱼类DNA条形码数据库尚不完备以及不同引物的特性不同,使用多对引物将大大增加物种的检出概率和e DNA研究的可信性。本研究展示了edna在评估生物多样性方面的潜力,有助于将来的鱼类edna研究,从而为鱼类多样性的保护提供参考。

摘要：环境DNA(Environmental DNA,edna)技术作为河流健康评价的关键工具,在水生生态系统生物分析中表现出极大的应用潜力。然而,edna与广泛存在于水体中的沉积物的关系非常复杂,同时也受到水流的影响,这严重限制了edna技术的推广和应用。研究以中国重要淡水养殖鱼类草鱼为对象,探讨水流和沉积物对草鱼edna持久性的影响。结果显示:①在流动水体中,edna降解速度随流速增加而加快;②沉积物的存在则加速了edna的降解过程,与沉积物铺设厚度相比,沉积物粒径对edna持久性的影响更为显著;③在静水中,edna降解速度随沉积物粒径增大而减缓,但在流动水中,水流干扰导致了相反的edna降解模式,即edna的降解速度随着沉积物粒径的增大而加快。研究突显了在edna实验设计及解释中考虑沉积物特性的重要性,对于edna技术在水生生态系统应用提供了宝贵参考。

摘要：The Awakening was Kate Chopin＇s masterpiece, describing a wealthy businessman＇s wife--edna＇s confusion, awakening, pursuit, and suffocation of self-awareness in the South of America in the late 19th century. With the method of close reading in new criticism, this paper reinterprets edna＇s awakening process. Her awakening process is accompanied by the symbolic image of ＂bird＂, representing women＇s situation in the patriarchal society and carrying edna＇s hope for freedom, love, and self-realization. The application of bird＇s symbolic image reflects Kate Chopin＇s compassion for women in the patriarchal society, making the novel more appealing with its profound humanitarian connotations.

摘要：研究以舟山岛礁水域优势鱼种褐菖鲉(Sebastiscus marmoratus)为研究对象,通过与其他5种近缘鱼种COⅠ基因片段序列的比较分析,设计了褐菖鲉特异性引物与Taqman探针;基于K2P模型计算得到褐菖鲉与其他5种近缘鱼种在引物探针区的种间遗传距离,褐菖鲉与日本鬼鲉遗传距离最大(0.3202),而与同属的三色菖鲉种间遗传距离最小(0.2617)。将均重为12.46 g的褐菖鲉按2、4、8、16和32尾分别放入室内5个容积为1 m^(3)的圆形水桶,并在40 m×15 m×0.3 m三个养殖池内分别投放20、40和80尾褐菖鲉,其后的0、8h、16h、1d、1.5d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d及10d进行水样抽取,测定褐菖鲉edna浓度。分析结果表明,褐菖鲉edna浓度前后变化明显,3d后较为稳定,且与各自群体密度相对应,从相关系数和拟合趋势可以看出养殖密度与其edna浓度之间呈线性函数相关关系,为褐菖鲉资源edna监测评估奠定基础。

摘要：已知的鱼类环境DNA(environmental DNA,edna)宏条形码通用引物主要位于线粒体核糖体基因区,这些12S和16S引物存在部分近缘鱼类无法识别及参考序列不足等问题。本研究以海南岛淡水鱼类为调查对象,基于8目26科101属150种鱼类COⅠ序列,筛选出6个侧翼保守区;综合碱基变异、物种鉴定、e DNA降解及高通量测序读长需求,在4个侧翼保守区设计了26条引物,其中6条引物未达到Premier评分要求;72种海南淡水鱼类的首轮PCR结果显示,有11条引物的通用性较高,其中,PCR成功种数≥70且条带亮度均大于marker的引物有5条;次轮PCR结果显示,5条引物相互搭配产生的3(正向)×2(反向)套引物组合的扩增成功率均为100%(72种/72种),经PCR条带长度、亮度筛选后表现最优的引物组合为“HN-A-F4、HN-D-R3”(以下简称HN-COⅠ)。30个水样高通量测序结果显示,HN-COⅠ产生的待分析序列总数、鱼类序列总数、OTUs总数和鱼类OTUs总数分别为MiFish-U的0.77倍(8919976/11532126)、1.22倍(2264965/1863905)、0.85倍(406/477)和1.32倍(86/65);HN-COⅠ产生的鱼类OTUs注释到种、属、科及科以上水平的占比分别为81.40%、11.63%和6.98%,MiFish-U则分别为81.54%、4.62%和13.85%。“引物+水样”的NMDS聚类图形成边界明显的2组(胁强系数=0.15);HN-COⅠ的属内物种扩增子两两遗传距离最小值及平均值均分别是MiFish-U的1.23倍(0.0069/0.0056)和1.57倍(0.1559/0.0994)。室内6个密度组鲤鱼(Cyprinus carpio carpio)“生物量–拷贝数”线性回归方程的相关系数较低,HN-COⅠ及MiFish-U均无法准确反映鲤鱼的生物量。本研究筛选并比较了HN-COⅠ与MiFish-U的优劣,表明HN-COⅠ对海南岛淡水鱼类具有更高的靶向性,不仅在防止微生物、哺乳类等非目标生物e DNA污染方面有优势,而且更有利于海南岛淡水鱼类的检出和准确鉴定。

摘要：在简介厂级监控信息系统和实时历史数据库edna的基础上,分析了火电厂信息系统的发展过程和面临的问题,详细阐述了SOA设计思想及其实现,并给出了使用edna实现该设计思想的框架以及该框架的应用情况。

摘要：The American writer Kate Chopin＇s masterpiece, The Awakening published in the late 19th century is one of the classics in female literature. The heroine edna having the courage to pursue self-reliance and express her self-awareness, is regarded as a ＂new woman＂, while the comments on her husband, Mr. Pontellier are quite negative--He regards edna as a private property and a sexual tool, leading to her awakening and suicide. In this paper, the author reinterprets Mr. Pontellier with the method of close reading in new criticism, deeming that it is the binary opposition in thinking that leads to the misreading. Mr. Pontellier was just a follower of the tradition and custom. The objective evaluation and reinterpretation to him can help students to develop the habit of critical thinking and the courage to pursue truth is case they form a simple thinking mode of the binary opposition.

摘要：目的研究南方汉族人群KIR2DL4基因的遗传多态性。方法采用自行设计的PCR引物对306名南方汉族无关个体K豫2DL4框架基因的8个外显子进行扩增，之后进行双向测序，用Assign3．5软件分析各样本的等位基因型。对与国际IPD-KIR数据库不完全匹配的样本进行cDNA分子克隆和单倍型测序。结果共检出11种KIR2DL4等位基因，其中KIR2DL4＊00503、＊00504、＊032、＊033、＊034被WHOHLA因子命名委员会KIR分委会正式命名为新等位基因。检出的等位基因及其频率分别为KIR2DL4＊00102（75．5％）、＊00103（8．2％）、＊00501（34．0％）、＊00503（0．7％）、＊00504（0．7％）、＊00602（14．4％）、＊00801（11．4％）、＊011（22．2％）、＊032（0．3％）、＊033（0．3％）和＊034（0．3％）。第7外显子CDSnt811位置正常的10A型等位基因（KIR2DL4＊00102、＊00103、＊00501、＊00503、＊00504、＊00602、＊032、＊033、＊034）和CDSnt811位置缺失腺嘌呤的9A型等位基因（K琥2DL4＊00801、＊011）的检出比例分别为97．0％及33．0％，约为2．9：1。结论获得了南方汉族人群KIR2DL4等位基因分子遗传多态性的基础数据，可为移植、生殖免疫、疾病关联研究及人类进化等提供参考。

摘要：目的　获得粉尘螨Derf 2cDNA克隆及亚克隆 ,并进行测序。方法　设计合成引物 ,从粉尘螨螨体中提取RNA ,经RT -PCR获得cDNA ,PCR扩增目的片段经纯化回收后克隆至 pMD - 18T ,转化大肠杆菌E coliJM10 9,经PCR初筛挑选阳性克隆并测序 ,将PCR筛检阳性重组子及pET - 32a(+)表达载体分别用SacⅠ和NotⅠ双酶切 ,连接转化至E coliCompe tentCellJM 10 9中过夜培养 ,挑选菌落进行酶切鉴定。结果　从粉尘螨基因组RNA中扩增出Derf 2cDNA片段 ,成功构建pET - 32a(+) -Derf 2亚克隆 ,酶切产物的大小与预期相符。 结论　成功地对粉尘螨Derf 2cDNA进行体外扩增并构建pET - 32a(+) -Derf 2亚克隆。

摘要：文章以太钢集团能动总厂厂级监控系统(SIS系统)建设为背景,扼要介绍了能动总厂热电生产现状及调度管理中遇到的问题。结合生产实际阐述了SIS系统总体设计思路、网络架构、edna实时数据库的特点及服务器、客户端的服务组件构成。重点说明各控制系统接口数据采集方式、通讯软件选取和SIS系统生产数据监控、信息分析与统计、机组级及厂级性能计算模型和方法等方面的设计内容。在总结SIS系统应用的优缺点基础上,对SIS系统在冶金企业热电生产中的应用做了展望。