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金黄色葡萄球菌纤连蛋白结合蛋白A基因的克隆及其原核表达: 收藏
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引用; 《中国兽医科学》2006年第4期36卷 266-269页; 作者：贺宽军郭闯张涌西北农林科技大学生物工程研究所陕西杨凌712100 内蒙古民族大学动物科技学院内蒙古通辽028042; 根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因(fnba)序列设计了1对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增;结果获得了3 600bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pGEM T easy载体中,成功地构建了克隆质粒pGEM-fnba。以HindⅢ和XhoⅠ...; 根据GenBank中纤连蛋白结合蛋白A基因(fnba)序列设计了1对特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板,进行PCR扩增;结果获得了3 600bp的DNA片段。将PCR产物克隆至pGEM T easy载体中,成功地构建了克隆质粒pGEM-fnba。以HindⅢ和XhoⅠ双酶切pGEM-fnba和pET28a(+),将纯化的基因fnba亚克隆至pET28a(+)中,构建了原核表达质粒pET28a-fnba,并将其转化至***21(DE3)感受态细胞中,经1 mmol/L IPTG诱导和SDS-PAGE分析,在约165 ku处出现了与预期目的蛋白一致的外源蛋白带。Western-blotting分析表明,该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。; 来源：详细信息评论

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