摘要：目的构建串联表达5个针对大鼠kir2·1基因shRNA的真核表达载体,观察其对该基因表达的影响。方法选择5个针对大鼠kir2·1基因的RNA干扰位点,分别设计合成相应的5对寡核苷酸链,形成双链后分别连入带有U6启动子的相应载体,反复酶切连接将表达5个kir2·1shRNA的目的基因依次连接入载体pEGFP6-1,构建成串联真核表达载体pEGFP6-1kir2·1,将其转染培养的大鼠心肌细胞,RT-PCR和Western印迹检测其对kir2·1mRNA转录和蛋白表达的影响。结果成功构建串联表达5个大鼠kir2·1基因shRNA的真核表达载体,该载体对大鼠心肌细胞kir2·1mRNA转录的抑制率为83·5%,对心肌细胞kir2·1蛋白表达的抑制率为68·1%。结论串联表达多个大鼠心肌细胞kir2·1基因shRNA真核表达载体介导的RNA干扰可以特异性抑制该基因的表达,可能成为制造生物起搏器的一种新方法。