摘要：目的自身免疫性内耳病(autoimmune inner ear disease,AIED)是目前临床上一部分可以有效治疗的内耳疾病,对其的研究工作具有重要的临床实际意义和实用价值,文中探讨microrna-146a对免疫介导性内耳病(immune-mediated inner ear disease,IMIED)的免疫调节作用、及其治疗效果。方法采用钥孔戚血蓝蛋白抗原在已致敏的豚鼠圆窗龛局部免疫,制成IMIED动物模型30只,按配对设计分为microrna-146a重组慢病毒组、空载慢病毒对照组、模拟手术对照组3组。microrna-146a重组慢病毒组:鼓阶内注射microrna-146a重组慢病毒;空载慢病毒对照组:鼓阶内注射慢病毒空载体;模拟手术对照组:鼓阶内注射PBS溶液。分别于免疫前、免疫后和鼓阶注射1周后,测试听觉功能和血清抗KLH特异性抗体水平变化。鼓阶内注射后1周(ABR试验后),每组3只动物行HE染色和光镜观察;另3只动物行荧光观察(慢病毒载体转染情况);,4只动物并测试内耳局部组织microrna-146a的含量及其变化。结果 3组动物免疫后血清中特异性抗KLH抗体水平较免疫前升高,重组慢病毒载体组[(1.90±0.74)vs(0.09±0.01),P<0.05],空载体对照组[(2.20±0.75)vs(0.11±0.02),P<0.05],模拟手术组[(2.10±0.64)vs(0.11±0.03),P<0.05]。与免疫前对应耳比较,免疫后、鼓阶注射后ABRⅢ波平均阈值均增加(P<0.05);与免疫后对应耳比较,重组慢病毒载体鼓阶内注射后ABRⅢ波平均阈值降低(P<0.05)。重组慢病毒载体组内耳microrna-146a含量(1290.0±660.0)较空载体对照组(369.5±73.9)和模拟手术组(476.6±148.0)明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。荧光观察显示:micro-RNA146a重组慢病毒载体在内耳中分布在骨螺旋唇、螺旋神经节传入纤维、螺旋韧带基底细胞、Corti器、血管纹等,内耳光镜观察显示内耳免疫炎性反应较空载慢病毒对照组和模拟手术对照组明显减轻。结论 micro-RNA146a重组慢病毒载体经鼓阶注射到内耳后,可在内耳广泛分布和转染,内耳组织中microrna-146a的含量明显升高。重组micro-RNA146a慢病毒载体内耳导入可显著减轻内耳免疫炎性病理损伤和听觉功能障碍。

摘要：目的建立一种通用、敏感、特异的microrna检测方法,用于检测布鲁氏菌病患者血浆microrna-146a的表达,探讨其作为诊断标识的可能性。方法以microrna-146a模拟物为待检物,通过正交实验设计,对退火温度、探针浓度、试剂盒选择进行优化,建立特异敏感的通用检测方法;从布病患者和正常健康人血浆样本提取RNA,应用通用探针法进行检测,比较布病患者血浆microrna-146a的表达变化。结果建立了优化的通用探针法,与染料法相比特异性更强、扩增范围更大,具有通用检测能力。应用通用探针法检测布鲁氏菌病患者血浆microrna-146a,发现布病患者血浆中microrna-146a的表达被抑制(P<0.01),表明其可能作为布病诊断的分子标识。结论经优化的通用探针法是一种通用、敏感、特异的检测方法,可用于microrna的检测,microrna-146a可能作为布病诊断的标识分子。

摘要：目的探讨黄芩苷抑制糖尿病大鼠心肌成纤维细胞分化机制。方法选取2021年4月至6月24例雄性SD鼠作为研究对象,采用随机区组设计法将其分为对照组(8例)、模型组(8例)和治疗组(8例)。对照组采用普通饲料饲养的方法;模型组采用尾静脉注射45 mg/kg链脲佐菌素方法建立糖尿病模型,普通饲料饲养;治疗组采用尾静脉注射45 mg/kg链脲佐菌素方法,成模后腹腔注射黄芩苷药液每天每千克15μmol/L,普通饲料饲养。比较三组血糖、心脏重量指数、microrna-146a(miR-146a)和α-平滑肌细胞肌动蛋白(α-SMA)。结果治疗组血糖、心脏重量指数低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组血糖、心脏重量指数均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗组miR-146a高于模型组,α-SMA低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组miR-146a低于对照组,α-SMA高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论黄芩苷能够抑制糖尿病大鼠心肌成纤维细胞分化,干预心肌纤维化,机制与黄芩苷调控心肌成纤维细胞miR-146a表达,抑制α-SMA蛋白有关。