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pegfp基因启动子区甲基化的梯度降落PcR定量检测法: 收藏
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引用; 《环境与健康杂志》2010年第5期27卷 396-399页; 作者：江艳王先良王春晖王小利杨怡姝段小丽聂静王菲菲张金良厦门大学海洋与环境学院福建厦门361005 中国环境科学研究院环境污染与健康研究室北京100012 安徽医科大学公共卫生学院安徽合肥230032 北京工业大学生命科学学院北京100022; 目的改进亚硫酸氢钠测序法,并在cMV基因启动子甲基化检测中进行验证。方法提取pegfp-c3质粒重组人肝癌细胞株HepG2 DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后质粒基因cMV启动子序列设计特异引物并结合梯度降落PcR扩增,T-A载体克隆、测序,目标...; 目的改进亚硫酸氢钠测序法,并在cMV基因启动子甲基化检测中进行验证。方法提取pegfp-c3质粒重组人肝癌细胞株HepG2 DNA,亚硫酸氢钠化学修饰,针对修饰后质粒基因cMV启动子序列设计特异引物并结合梯度降落PcR扩增,T-A载体克隆、测序,目标区域甲基化定量。结果 pegfp-c3质粒基因约600bp的cMV启动子区甲基化水平可以精确定量,检测结果与标准品一致,重复测量结果稳定。结论改进后亚硫酸氢钠测序法能明显减少非特异性扩增,提高PcR效率,更适于基因甲基化状态的检测。; 来源：详细信息评论

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