摘要：为了构建por基因稳定敲除(por^(KO))、回补(porCO)、过表达(por^(OE))的LO2细胞株,以便为后续深入开展por基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究提供细胞模型。本研究首先利用CRISPR/Cas9技术设计2条靶向por基因的sgRNA并克隆至lentiCRISPR v2载体,进行慢病毒包装与感染,筛选出LO2 por^(KO)单克隆细胞后进行测序及Western blot鉴定。其次用同源重组方法构建pcDNA3.1(+)/myc-His B-por重组质粒,经对por^(KO)细胞和野生型细胞转染分别构建LO2 porCO及LO2 por^(OE)细胞株,以G-418筛选后进行Western blotting鉴定。再用4μmol·L^(-1)及8μmol·L^(-1)AFB_(1)分别对野生型、LO2 por^(KO)、LO2 porCO、LO2 por^(OE)细胞株染毒48 h,观察细胞形态并测定细胞存活率。结果表明,靶向exon5的sgRNA-2可成功敲除por基因,得到LO2 por^(KO)细胞株;成功构建表达por重组蛋白的LO2 porCO及LO2 por^(OE)细胞株。对AFB_(1)处理后的各细胞存活率测定结果表明,相较于野生型LO2细胞43.66%±0.58%和27.90%±0.46%的存活率,LO2 por^(KO)细胞存活率具有极显著性差异,均为100%(P<0.0001);LO2 porCO细胞存活率仍有显著性差异,分别为57.07%±0.74%和42.54%±0.68%(P<0.05);LO2 por^(OE)细胞存活率则显著降低,分别为24.58%±0.92%和17.99%±0.81%(P<0.01)。综上所述,本研究成功构建了LO2 por^(KO)、LO2 porCO、LO2 por^(OE)细胞株,并以AFB_(1)染毒处理分别研究了各细胞株的存活率和细胞形态学变化,发现por基因对AFB_(1)所致细胞毒性的影响巨大。研究结果为后续深入开展por基因在AFB_(1)致毒性机理中的功能研究奠定了基础。

摘要：在电影产业高速发展又高度发达的今天,电影从单一的视觉艺术的过去进入到了一个视听均衡的新阶段。电影中的音乐对于推动剧情发展、烘托影片主题,渲染画面情绪,调节气氛等都有着重要作用。音乐por una Cabeza在影片《闻香识女人》,《辛德勒名单》以及《真实的谎言》中均有出现,与不同影片结合的同一原声,在电影作品中又有着不同的表现。

摘要：目的:研究CYP3A5、ABCB1和por基因多态性对术后3个月以上肾移植受者他克莫司(FK506)剂量、浓度以及肾功能的影响。方法:选取某院行同种异体肾移植手术的320例患者为研究对象,采用聚合酶链式反应连接的限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析法和测序法检测患者CYP3A5、ABCB1和por基因型;由于CYP3A5*3基因突变导致CYP3A5酶失活,因此将CYP3A5*3*3定义为CYP3A5非表达者(n=163),将CYP3A5*1*1和CYP3A5*1*3定义为CYP3A5表达者(n=157),比较CYP3A5表达者和非表达者间FK506血药浓度、剂量、浓度剂量比及肾小球滤过率(eGFR)的差异。结果:在移植后1、4年,CYP3A5表达的FK506血药浓度低于非表达者(P=0.0067,P=0.0004),其剂量在移植后长达8年高于非表达者(P=0.0004),而浓度剂量比则低于非表达者(P=0.0060),差异均有统计学意义。ABCB13435、ABCB11236和por基因多态性对FK506血药浓度、剂量及浓度剂量比均无影响,差异无统计学意义(P=0.3040,P=0.1190,P=0.3450)。在移植后3、6个月和2年后,CYP3A5非表达者的eGFR高于CYP3A5表达者,差异有统计学意义(P=0.0240,P=0.0187,P=0.0309),提示CYP3A5基因多态性对移植肾功能有长期影响。结论:CYP3A5基因多态性对肾移植受者FK506的浓度、剂量、浓度剂量比及移植后的肾功能有长期影响。

摘要：纽约上东区的潮流发布201 1秋冬纽约时装周上,一场独具风格的发布秀在上东区中央公园附近的古典别墅中上演:英国歌德式16世纪雕刻墙面、佛罗伦萨典雅壁炉、托斯卡纳的华美大理石地板……来自世界各地的32位名模以清雅的妆容移步而出,穿梭在装修风格迥异的空间内,灵动演绎品牌创意总监FionaCibani精心打造的ports 1961 2011秋冬"裁衣筑影"系列。灵感源自欧式古典建筑,Fio ra将那些独特的结构、富有肌理的大理石、

摘要：在RFID标签的设计中,系统的功耗及性能一致性至关重要。上电复位电路作为整个系统的初始复位信号,其检测电源电压的大小、一致性和可测试性直接影响到标签的性能好坏和量产后的一致性。本文针对RFID标签对低功耗、高一致性的需求,通过创新设计了一款低功耗的por模块,针对por的特点设计了测试电路,成功实现por电路检测电压的可测试、可筛选和可调整。圆片测试结果符合设计预期,为实现高性能,低成本的标签设计奠定基础。

摘要：目的运用实时荧光环介导等温扩增技术(LAMP)建立一种快速准确检测淋球菌的方法 ,以期用于淋病的早期临床诊断。方法以淋球菌por A为靶基因,设计保守性和特异性良好的引物,以淋球菌标准菌株基因组DNA为模板,进行LAMP扩增,用23种其他在生殖系统中存在的微生物验证其灵敏度和特异性。结果实时荧光LAMP法可检测到1 pg/μl(103 CFU/ml)淋球菌基因组DNA,稳定性良好,其针对23种其他在生殖系统中存在的微生物均不能扩增,por A引物对淋球菌高度特异,阳性结果 15 min可快速检出。结论成功建立了检测淋球菌por A的LAMP技术,为淋球菌的快速检测提供了新的手段,有望成为淋球菌常规检测的简便方法 。